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白花丹素对骨肉瘤MG-63细胞迁移的影响及其作用机制

2016-07-30田林强刘晓潭郭志豪王宏伟张天吉

中国癌症防治杂志 2016年3期

田林强 刘晓潭 郭志豪 王宏伟 张天吉

白花丹素对骨肉瘤MG-63细胞迁移的影响及其作用机制

田林强刘晓潭郭志豪王宏伟张天吉

【摘要】目的 观察白花丹素对骨肉瘤细胞迁移的抑制作用并初步探讨其可能的机制。方法 以2.5 μmol/L、5 μmol/L 和10 μmol/L浓度白花丹素分别作用于骨肉瘤MG-63细胞,以含0.1%DMSO完全培养基为对照组。作用24 h后,Transwell法观察骨肉瘤MG-63细胞迁移能力,Real-time PCR检测骨肉瘤MG-63细胞中Ezrin基因mRNA表达情况,Western blot检测Ezrin蛋白和p-Ezrin的表达情况。结果 Transwell结果显示,作用24 h后,各实验组下层小室细胞数明显减少,2.5 μmol/L组、5 μmol/L组和10 μmol/L组的细胞迁移率分别为(69.9±4.5)%、(39.3±3.5)%和(26.2±4.1)%,呈浓度依赖性(P<0.05);Real-time PCR结果显示,骨肉瘤MG-63细胞中Ezrin mRNA表达水平明显下降,呈浓度依赖性(P<0.05)。Western blot结果显示,Ezrin蛋白和p-Ezrin的表达量明显降低,呈浓度依赖性(P<0.05)。结论 白花丹素能够抑制骨肉瘤MG-63细胞迁移,其作用机制可能与抑制骨肉瘤MG-63细胞中Ezrin的表达及活化有关。

【关键词】骨肿瘤;骨肉瘤;白花丹素;Ezrin基因;MG-63细胞;迁移

骨肉瘤多发于青少年和老年人群,转移是治疗失败和死亡的主要原因之一。初诊时15%~20%的患者已发生远处转移,治疗期间40%~60%的患者可发生转移,其中绝大部分为肺部转移[1]。Ezrin蛋白是细胞骨架蛋白家族成员,在细胞变形和运动中发挥重要作用。本组前期实验研究发现,白花丹素可诱导骨肉瘤细胞凋亡,可能通过p53途径和产生细胞内活性氧实现,但对骨肉瘤细胞转移的影响并不十分清楚[2]。为

1 材料与方法

1.1材料和仪器

白花丹素(plumbagin)、DMSO购自美国Sigma公司。将白花丹素溶于DMSO溶液中,配成0.1 mol/L储存液存放于-20℃冰箱备用。……

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