魏艳玲，郭爱疆,2，刘光学，杨　锐，张少华，侯俊玲，骆学农,2



猪带绦虫胰岛素受体TsIR-4810的鉴定及LBD区表达

魏艳玲1，郭爱疆1,2，刘光学1，杨锐1，张少华1，侯俊玲1，骆学农1,2

1. 中国农业科学院兰州兽医研究所，家畜疫病病原生物学国家重点实验室，农业部兽医公共卫生重点开放实验室，甘肃省动物寄生虫病重点实验室，兰州730046；2. 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，扬州225009

摘要：目的克隆鉴定猪带绦虫胰岛素受体TsIR-4810基因，并表达其LBD 区。方法设计猪带绦虫胰岛素受体TsIR-4810特异性引物，并分段进行RT-PCR扩增。TsIR-4810的完整ORF序列经BLAST同源比对，SMART预测其结构域，SWISS-MODEL同源建模，并用PhyML构建系统发育树。将TsIR-4810的LBD区克隆至pET-30a中进行诱导表达，表达产物经SDS-PAGE和Western-blot鉴定。结果获得的目的基因完整的ORF为4 920 bp，其编码蛋白的氨基酸序列与其他生物的胰岛素受体一样，具有相对保守的分泌信号肽、受体L1和L2结构域、FnⅢ结构域、跨膜区和受体酪氨酸激酶域。构建的LBD重组菌株诱导表达了63 ku的目的蛋白，与预期大小相符，且主要以包涵体形式存在。结论TsIR-4810为猪带绦虫胰岛素受体基因，其LBD区的成功表达，将为开展基于胰岛素受体LBD区的新型疫苗和药物奠定基础。

关键词：猪带绦虫；胰岛素受体；鉴定；LBD；表达

猪带绦虫(Taeniasolium)是重要的人兽共患寄生虫病[1-2]。胰岛素信号通路作为非常古老的信号传导途径[3-4]，在控制细胞生长及代谢调控中发挥重要作用，并且可以影响细胞与外界环境的相互作用。最新研究表明，寄生蠕虫不仅存在胰岛素(样)多肽(ILPs)，而且还存在与哺乳动物同源性很高的胰岛素受体(IR)及下游分子，并可利用宿主胰岛素调节自身代谢和生长发育。……