2型猪链球菌中国强毒株及其covR基因突变株的蛋白质组学研究
2016-07-29李先富王长军潘秀珍
倪 华,张 剑,郑 峰,胡 丹,李先富,王长军,潘秀珍
2型猪链球菌中国强毒株及其covR基因突变株的蛋白质组学研究
倪华1,2,张剑1,2,郑峰2,胡丹2,李先富2,王长军2,潘秀珍1,2
1.南京师范大学生命科学学院,南京210023;2.南京军区军事医学研究所,南京210002
摘要:目的通过比较2型猪链球菌中国强毒株05ZYh13及其covR基因突变株△covR蛋白表达谱差异,质谱鉴定差异表达蛋白,分析CovR在蛋白表达调控中的作用。方法首先将05ZYh13和△covR在THB培养基中培养至对数期,然后裂解细菌制备蛋白样品。第一向等电聚焦电泳在ph1~10的IPG胶条上完成后进行SDS-PAGE电泳,电泳胶经扫描分析后选取蛋白点进行质谱鉴定。结果05ZYh13和△covR全菌蛋白裂解液经二维电泳分别得到559和491个蛋白点,经比对发现两菌株蛋白表达量差异3倍以上蛋白点40个,经质谱鉴定出15个蛋白,主要涉及细胞代谢的酶类如谷氨酸脱氢酶、腺苷酸激酶、PTS系统成分等,以及分子伴侣蛋白如GroEL和Dnak等;电泳分离得到△covR特异蛋白点124个,质谱鉴定出15个,主要为参与细胞糖代谢过程中的酶,如磷酸甘油酸激酶、甘油醛-3-磷酸脱氢酶、丙酮酸激酶等;质谱鉴定05ZYh13特异表达蛋白5个。结论鉴定05ZYh13和△covR差异表达蛋白35个,部分蛋白涉及细菌毒力、宿主细胞粘附、细胞分裂等生命过程,同时蛋白分子伴侣在△covR中的表达变化说明CovR的调控可能发生在蛋白修饰水平,为研究CovR在调控细菌毒力中的作用和分子机制奠定基础。
摘要:目的通过比较2型猪链球菌中国强毒株05ZYh13及其covR基因突变株△covR蛋白表达谱差异,质谱鉴定差异表达蛋白,分析CovR在蛋白表达调控中的作用。……
