张 蕾，于永昂，2，杨天佑

（1.河南科技学院生命科技学院，现代生物育种河南省协同创新中心，河南新乡 453003；2.西北农林科技大学农学院，陕西杨凌 712100）

小麦谷胱甘肽S-转移酶基因的克隆及原核表达

张 蕾1，于永昂1，2，杨天佑1

（1.河南科技学院生命科技学院，现代生物育种河南省协同创新中心，河南新乡 453003；2.西北农林科技大学农学院，陕西杨凌 712100）

为了进一步研究小麦谷胱甘肽-S-转移酶基因（TaGST）的功能，采用RT-PCR方法分离了小麦谷胱甘肽-S-转移酶基因（TaGST）的ORF全长cDNA，并进行了生物信息学分析。结果表明：小麦TaGST基因的ORF全长690 bp，编码229个氨基酸；TaGST蛋白分子质量为25.81 kDa，p I为5.29。系统进化分析表明，该基因编码蛋白与水稻OsGST蛋白的氨基酸同源性最高，与已知植物GST家族成员的氨基酸序列聚类分析将TaGST聚为Phi类GST。构建原核表达载体pET32-TaGST，对TaGST基因进行原核表达，SDS-PAGE结果表明，其所表达蛋白与预期蛋白大小一致。为进一步研究该基因的特性和功能奠定了理论基础。

小麦；谷胱甘肽过S-转移酶；基因克隆；原核表达

谷胱甘肽-S-转移酶（Glutathione-S-transferase，GSTs）是普遍存在于动植物中的一种多基因编码的多功能蛋白酶，在清除生物和非生物胁迫产生的氧化损伤中起着重要的作用［1-2］，其一般是由同源或异源二聚体蛋白组成的2个亚基来催化还原型谷胱甘肽与亲电的化合物进行结合反应，降低其亲电活性，最终达到脱毒作用［3-4］。目前，已经在拟南芥、水稻、杨树、玉米和大豆等植物中发现了多种GST蛋白，其中在拟南芥、水稻和杨树中就分别发现了53，59，81个GST蛋白［5-7］。根……