于亚娟，王凤龙，丁玉林，毕艳楠

(内蒙古农业大学兽医学院，内蒙古呼和浩特 010018)



大肠杆菌对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞bFGF及其受体FGFR2表达的影响

于亚娟，王凤龙*，丁玉林，毕艳楠

(内蒙古农业大学兽医学院，内蒙古呼和浩特 010018)

摘要[目的]探讨大肠杆菌(Escherichia coli)对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)bFGF及其受体FGFR2表达的影响。[方法]取热灭活的0、105、106和108 CFU/mL浓度的大肠杆菌作用于体外培养的奶牛乳腺上皮细胞，分别在作用后6、12、24和48 h，采用荧光定量PCR和Western blot方法检测bFGF和FGFR2的mRNA和蛋白的表达情况。[结果]bFGF mRNA表达与对照组相比随着大肠杆菌浓度的升高而显著上调(P<0.01)，24 h bFGF表达量最高。BMEC bFGF蛋白表达随着大肠杆菌浓度的增加而上调，24 h表达量达到最高；FGFR2 mRNA相对表达量除6 h组外随大肠杆菌浓度的增加而呈现降低、升高、降低的变化趋势，48 h表达量达到最高。各处理组与对照组相比FGFR2蛋白表达随时间的延长、菌液浓度的增加而上调。[结论]大肠杆菌刺激奶牛乳腺上皮细胞可以明显促进bFGF和FGFR2的表达，具有浓度和时间依赖性。

关键词bFGF；FGFR2；大肠杆菌；奶牛乳腺上皮细胞

奶牛乳腺炎是奶牛最常见、最多发且造成经济损失最大的疾病之一。该病可使奶牛泌乳机能受损，生殖机能失调，奶牛福利受损，引起产奶量下降[1]，严重者可引起泌乳机能完全丧失，导致乳腺纤维化。大肠杆菌是引起奶牛乳腺炎是主要原因之一，大肠杆菌感染大多引起严重的临床症状，导致临床型乳腺炎[2]。大量研究表明，bFGF(Basic fibroblast growth factor-2，bFGF2)是一种广泛的有丝分裂原，可通过自分泌或旁分泌的方式来促进包括肿瘤细胞及血管内皮细胞在内的多种细胞的增殖、分化和抗凋亡作用[3]，bFGF是通过与成纤维细胞生长因子受体(Fibroblast growth factor receptors，FGFRs)结合发挥其生物学效应，FGFR2又是其高亲和力受体。研究表明，bFGF可诱导体外肾小管上皮细胞向细胞外基质(EMT)转化[4]。据报道，bFGF在肝纤维化中晚期主要是促进ECM的产生[5]。FGF2/FGFR 信号通路在多种组织细胞向肌成纤维细胞转分化过程中起到了重要作用，包括上皮细胞、内皮细胞和肿瘤细胞[6]。……