周晨妍，刘振华，王丹丹,2，李同彪，朱新术，王燕

1(新乡医学院 生命科学技术学院,合成生物学改造工程与应用实验室，河南 新乡，453003)2(新乡医学院 三全学院，河南 新乡，453003)



木聚糖酶Xyn43A基因在大肠杆菌及毕赤酵母中的表达比较

周晨妍1*，刘振华1，王丹丹1,2，李同彪1，朱新术1，王燕1

1(新乡医学院 生命科学技术学院,合成生物学改造工程与应用实验室，河南 新乡，453003)2(新乡医学院 三全学院，河南 新乡，453003)

摘要根据木聚糖酶Xyn43A基因序列，设计特异性引物，以pMD18-T-Xyn43A重组质粒为模板克隆Xyn43A成熟肽基因，将该基因分别克隆到大肠杆菌表达载体pET-28a和毕赤酵母表达载体pPIC9K中，分别在大肠杆菌BL21及毕赤酵母GS115中表达。重组酶在大肠杆菌中胞内表达，比酶活力可达61.43 U/mg。重组酶在毕赤酵母中分泌表达，比酶活力可达145.24 U/mg。酶学性质显示，BL21-Xyn43A、GS115-Xyn43A重组酶最适温度、pH相同均为45 ℃、pH 5.0。GS115-Xyn43A温度稳定性、pH稳定性均优于BL21-Xyn43A。

关键词黑曲霉；木聚糖酶；大肠杆菌；毕赤酵母；表达

木聚糖是自然界中广泛存在的一种多糖，它的降解需要多种酶的共同参与，木聚糖酶是其中十分重要的一类酶[1]，目前已广泛应用于工业生产中[2-3]。很多微生物，例如：芽孢杆菌、酵母菌、曲霉、青霉、镰刀菌等都可产生木聚糖酶[4-5]。木聚糖酶种类很多，分布于糖基水解酶GH5，7，8，10，11，16，43，52及62多个家族，目前报道的木聚糖酶主要归属于GH10和GH11两大家族[6-8]，其他家族的木聚糖酶报道偏少。

我们在前期的研究过程中从实验室保藏的黑曲霉(Aspergillusniger)XZ-3S中克隆出木聚糖酶Xyn43A基因，并对其进行了详细的生物信息学分析，研究发现它属于糖基水解酶GH43家族，是一种新的木聚糖酶基因，Genbank登录号为JQ700383[9]。……