金修哲，何　雷，程相朝，张春杰，余祖华，韩海锋，杨丹芳，梅京京，李银聚

（河南科技大学动物科技学院/河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室，河南洛阳471003）



6种中药成分对猪传染性胃肠炎病毒的体外抑制作用

金修哲，何雷，程相朝，张春杰，余祖华，韩海锋，杨丹芳，梅京京，李银聚

（河南科技大学动物科技学院/河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室，河南洛阳471003）

摘要：【目的】为探讨连翘苷等 6种中药成分抗猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）的作用机制，明确其体外抗病毒作用效果，为抗TGEV的药物筛选提供依据。【方法】利用动物细胞培养技术，采用MTT比色法和细胞病变（CPE）观察法相结合，测定连翘苷、连翘苷元、绿原酸、咖啡酸、丁香酚、丹皮酚6种中药成分不同浓度下对猪睾丸细胞（ST）的毒性作用，通过观察细胞CPE情况，确定药物对细胞作用的最大安全浓度；同时测定病毒的TCID50，用细胞维持液配成100·TCID50病毒悬液备用；将6种药物在最大安全浓度范围内连续2倍倍比稀释后，分别采用先感染病毒后加药、先加药后感染病毒、药与病毒混合后感染细胞3种不同作用方式进行体外增殖抑制试验，各试验组均设置正常细胞对照组和病毒对照组，每组设置3个重复，通过酶标仪测得630 nm处OD值，计算出不同作用方式下中药成分分别对TGEV的抑制率，筛选出抗TGEV活性较好的中药成分，并分别记录抗病毒效果最佳时药物的浓度；6种中药成分与病毒作用后，测定TGEV的病毒滴度并进行比较分析、RT-PCR鉴定各个药物单体对病毒RNA合成的抑制情况，进一步明确各中药成分对TGEV的抑制作用。……