黄楚恒，李天然，黄晓斌，蔡立杰，卢光明，李延军



·论著·

转移相关基因干扰对肝癌转移潜能的影响

黄楚恒1，李天然2，黄晓斌1，蔡立杰1，卢光明3，李延军3

目的通过干扰高转移潜能肝癌细胞(MHCC97-H)中的骨桥蛋白(OPN)、肿瘤增殖性因子肿瘤生长因子β1(TGFβ1)基因，使之减少OPN、TGFβ1表达，观察MHCC97-H转移能力的变化情况。方法对MHCC97-H细胞行OPN、TGFβ1基因干扰，qPCR法检测干扰效果。MHCC97-H细胞迁移细胞学实验采用transwells法。肺转移动物模型制作方法：裸鼠尾静脉注射各组细胞，含细胞数5×106个/只，隔天连续注射3次，2周后观察肺脏组织。离体肺脏组织标本制作，DAPI 染核处理10 min，甘油PBS 封片，置于荧光显微镜下观察。免疫荧光法检测裸鼠动物模型整合素αvβ3 表达。结果经基因干扰后MHCC97-H表达OPN和TGFβ1明显降低(P<0.05)。细胞学实验显示与对照组比较，经OPN和TGFβ-1干扰组MHCC97-H细胞迁移数量明显减少(P<0.01)。动物模型实验显示与对照组比较，OPN和TGFβ1干扰组肺组织中肝癌细胞较少，定量分析显示OPN和TGFβ1干扰组肺脏组织中肝癌细胞IOD值明显低于对照组(P<0.05)。OPN和TGFβ1干扰组与对照组比较整合素 αvβ3表达IOD值差异无统计学意义(P>0.05)。结论经OPN和TGFβ1基因干扰的MHCC97-H细胞肺转移能力有明显的下降，尤其是TGFβ1基因干扰组下降更加明显，但经OPN和TGFβ1基因干扰的MHCC97-H细胞表达整合素αvβ3能力无变化，整合素αvβ3介导参与了OPN和TGFβ1共同作用肝癌转移行为的变化。

肝癌，转移；骨桥蛋白；肿瘤生长转化因子；整合素

肝癌的转移行为是影响肝癌预后的关键因素之一，多种生物学因子参与到了肝癌的转移过程中。复旦大学肝癌研究所构建的具有不同转移潜能的肝癌模型成为研究肝癌转移行为的有效手段，具有高转移潜能肝癌细胞(MHCC97-H)肺转移率100%。本课题研究组主要关注对肝癌转移潜能的生物干预，为寻找合适的生物治疗靶点提供依据。前期通过基因工程技术对自体骨髓间充质干细胞(autologous bone marrow mesenchymal stem cells，BMSC)进行改造，使其增……