基因A型鸭甲肝病毒弱毒株免疫雏鸭的8种细胞因子mRNA变化分析
2016-07-14张焕容
张焕容,张 冰,王 栋,岳 华
(西南民族大学生命科学与技术学院,成都 610041)
基因A型鸭甲肝病毒弱毒株免疫雏鸭的8种细胞因子mRNA变化分析
张焕容*,张冰,王栋,岳华
(西南民族大学生命科学与技术学院,成都 610041)
为研究基因A型鸭甲肝病毒(DHAV-A)MY弱毒株对雏鸭细胞因子表达的影响,阐明细胞因子在DHAV-A弱毒疫苗免疫中的作用,利用荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)方法,检测DHAV-A MY弱毒株接种1日龄SPF雏鸭后0.25、0.5、1、2、3和5 d共6个时间点肝、脾和脑组织中IFN-α、IFN-β、IFN-γ,以及IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8和TNF-α共8种细胞因子的mRNA转录水平,并结合各时间点DHAV-A的荷载量进行分析。结果表明:肝和脑组织中2 d时间点以及脾组织中3 d时间点病毒荷载量达到最高;三种组织中,8种细胞因子的转录水平均随着病毒荷载量的增加而升高,且在各组织病毒荷载量最高时间点,8种细胞因子的转录水平均极显著升高(P<0.01),结果证明DHAV-A MY弱毒株可刺激雏鸭抗病毒细胞因子IFN-α、IFN-β、IFN-γ和TNF-α以及炎性细胞因子IL-1β、IL-2、IL-6和IL-8 mRNA的转录,本研究丰富了DHAV-A MY弱毒株的免疫机制。
基因A型鸭甲肝病毒;弱毒株;细胞因子;荧光定量RT-PCR
基因A型鸭甲肝病毒(duck hepatitis A virus genotype A,DHAV-A),是一种能够引起雏鸭急性高度致死性的传染性病原,雏鸭表现为急性发病、肝病变和高死亡率,主要危害4周龄以内的雏鸭。DHAV-A属于小RNA 病毒,入侵机体后主要感染鸭肝、脾和脑组织细胞,该病毒能够与细胞膜上特定受体结合并进入宿主细胞,大量复制,破坏细胞平衡,诱导细胞凋亡,进一步加剧病程发展[1]。为了预防DHAV-A的感染,研究者们把分离的DHAV-A野毒经过鸡胚传代弱化,培育出能够激发雏鸭免疫又不致病的弱毒疫苗株。本研究中的DHAV-A MY株即为本实验室经过鸡胚传代弱化培育的弱毒株。
实时荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)广泛应用于病毒定量和细胞因子转录等方面的研究。……
