机械应力联合维拉帕米对骨关节炎软骨细胞-琼脂糖三维模型蛋白聚糖代谢的作用
2016-06-22闾坚强范永前黄东辉林伟龙沈海敏徐沪济管剑龙
罗 丹 申 艳 闾坚强 范永前 黄东辉 林伟龙 沈海敏 徐沪济 管剑龙
(1 复旦大学附属华东医院免疫风湿科, 3骨科 上海 200040; 2 上海体育学院运动科学学院 上海 200433;4 第二军医大学长征医院风湿免疫科 上海 200003)
机械应力联合维拉帕米对骨关节炎软骨细胞-琼脂糖三维模型蛋白聚糖代谢的作用
罗丹1▲申艳1▲闾坚强2范永前3黄东辉3林伟龙3沈海敏3徐沪济4管剑龙1△
(1复旦大学附属华东医院免疫风湿科,3骨科上海200040;2上海体育学院运动科学学院上海200433;4第二军医大学长征医院风湿免疫科上海 200003)
【摘要】目的通过对骨关节炎软骨细胞-琼脂糖施压模型机械施压及联合维拉帕米干预,研究软骨细胞聚集蛋白聚糖(aggrecan,AGC)代谢的变化。方法选取膝关节炎患者关节置换术后胫骨平台软骨,分离软骨细胞,制作软骨细胞-琼脂糖三维模型,设置空白对照组、施压组和施压联合维拉帕米组。采用Flexcell FX-5000TM细胞加力仪施压(24 kPa,0.33 Hz,2 h),维拉帕米干预浓度设定为40 μmol/L。采用RT-PCR法和ELISA法分别检测AGC、ADAMTS-4、ADAMTS-5 mRNA和蛋白质水平。结果与空白对照组比较,施压组AGC mRNA水平显著升高(P=0.000),ADAMTS-5 mRNA水平显著降低(P=0.000),施压联合维拉帕米组AGC mRNA水平显著升高(P=0.012),ADAMTS-4和ADAMTS-5 mRNA水平均显著降低(P=0.000)。与空白对照组比较,施压组AGC mRNA水平显著增高(P=0.000)、ADAMTS-5水平显著降低(P=0.000);与施压组比较,施压联合维拉帕米组AGC水平显著增高(P=0.008),ADAMTS-4 和ADAMTS-5 水平均显著降低(P=0.000)。结论机械应力可促进骨关节炎软骨细胞AGC合成,维拉帕米可以加强机械应力的作用。
【关键词】骨关节炎;软骨细胞;蛋白聚糖;机械应力;维拉帕米
骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种中老年人最常见的骨关节病,以关节软骨进行性破坏、骨赘形成为病理特征。……
