丹参酮Ⅱ-A对大鼠成骨细胞BMP-2表达的影响*
2016-06-17莫朝伦张军梅王薮馨杨夏晴冯安琪
莫朝伦, 张军梅**, 贾 莹, 王薮馨, 杨夏晴, 冯安琪
(1.贵州医科大学 口腔医学院 口腔正畸学教研室, 贵州 贵阳 550004; 2.贵阳市口腔医院, 贵州 贵阳 550004)
丹参酮Ⅱ-A对大鼠成骨细胞BMP-2表达的影响*
莫朝伦1, 张军梅1**, 贾莹1, 王薮馨1, 杨夏晴2, 冯安琪1
(1.贵州医科大学 口腔医学院 口腔正畸学教研室, 贵州 贵阳550004; 2.贵阳市口腔医院, 贵州 贵阳550004)
[摘要]目的: 观察丹参酮Ⅱ-A(TsⅡ-A)对大鼠大鼠成骨细胞(OB)中骨形成蛋白-2(BMP-2)mRNA 表达的影响。方法: 培养原代大鼠OB并传代接种后采用Cell Counting Kit-8试剂盒比色法检测5×10-3、5×10-2以及5×10-1mg/L 3个浓度的TsⅡ-A(统称实验组)和对照组(0 mg/L TsⅡ-A)在第1、3、5、7天对OB的促增殖作用;RT-qPCR 检测各组OB BMP-2 mRNA 的表达。结果: 不同浓度TsⅡ-A对OB均有促增殖的作用(P<0.05),其中5×10-2mg/L浓度组促增殖作用最大;在各时间段中,组间比较OB BMP-2 mRNA表达量,实验组均高于对照组(P<0.05);各实验组组内比较,OB BMP-2 mRNA表达趋势为第7天>第5天>第3天>第1天(P<0.05)。结论: TSⅡ-A在一定的作用时间内可促进OB增殖,并上调OB中BMP-2 mRNA表达水平。
[关键词]丹参酮Ⅱ-A; 成骨细胞; 骨形成蛋白-2; 大鼠,Sprague-Dawley; 信使RNA
丹参属于经典活血化瘀类中药,是中医骨伤科方剂中的常用药,可促进骨的钙化,在骨折治疗中应用丹参后成骨细胞(osteoblast,OB)在数量及分布部位均明显增多[1-4]。丹参酮Ⅱ-A(tanshinone Ⅱ-A,TsⅡ-A)属于丹参的有效活性成分,具有雌激素样活性、抗菌消炎和促骨代谢等药理作用[5]。近年来,有学者应用TsⅡ-A于正畸治疗的实验研究中,表明了TsⅡ-A对牙周组织、颌骨改建和调节具有一定的影响作用[6-7]。至今,有关TsⅡ-A对OB增殖分化等方面的研究甚少,其中的相关机制研究不多且不够深入。本实验通过体外培养大鼠OB,观察TsⅡ-A对大鼠OB增殖影响,并采用实时定量PCR(real time PCR)方法,测定TsⅡ-A对大鼠OB骨形成蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)mRNA表达的影响,探讨TsⅡ-A在OB增殖中可能存在的作用机制,为TsⅡ-A的药理学作用提供理论参考。
1材料和方法
1.1材料
TsⅡ-A购于Aladdin-阿拉丁试剂(上海)有限公司。新生……
