韩贵宾，张 寿，孙薇薇，钟海波，陈建强，范忠诚（海口市人民医院骨科中心，海口 570208）



尼古丁抑制MIA诱导的骨关节炎软骨细胞凋亡

韩贵宾，张 寿，孙薇薇，钟海波，陈建强，范忠诚
（海口市人民医院骨科中心，海口 570208）

【摘要】目的 探讨尼古丁抑制碘乙酸钠（MIA）诱导的骨关节炎软骨细胞凋亡。方法 酶消化法分离大鼠原代软骨细胞，并用10－8，10－7，10－6，10－5mol/ L尼古丁处理细胞48 h，随后实验分为5组，除正常组外，其余4组皆用4 μM MIA处理24 h，并给予尼古丁。MTT法检测各组软骨细胞活力；Annexin V-FITC/ PI流式双染细胞术检测各组软骨细胞凋亡；分光光度法检测各组软骨细胞中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶（Caspase 3）活性；Western blot分析磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）激活状况及下游靶分子Bax，Bcl-2的表达情况。结果10－7，10－6mol/ L尼古丁显著促进大鼠软骨细胞活力（P＜0. 05），10－5mol/ L尼古丁显著降低大鼠软骨细胞活力（P＜0. 05），10－8mol/ L尼古丁对大鼠软骨细胞活力无影响（P＞0. 05）。10－8，10－7，10－6mol/ L尼古丁能剂量依赖性的提高MIA诱导的大鼠软骨细胞活力，并抑制MIA诱导的大鼠软骨细胞凋亡及Caspase 3活性（P＜0. 05）；10－7，10－6mol/ L尼古丁能提高PI3K表达及AKT磷酸化水平，并下调促Bax表达，上调Bcl-2表达（P＜0. 05）。结论 一定剂量尼古丁能显著的抑制MIA诱导的大鼠软骨细胞凋亡，可能与PI3K/ AKT信号通路有关。

【关键词】关键词尼古丁；骨关节炎；软骨细胞；凋亡

骨关节炎（osteoarthritis，OA）是一种慢性退行性骨关节疾病，其中软骨病变是骨关节炎的中心环节［1］。软骨细胞是软骨中唯一细胞结构，一旦软骨细胞死亡，只能缓慢再生甚至无法再生，而软骨细胞的死亡又破坏了胞外基质合成及降解的平衡，从而进一步加剧OA［2］。……