H-1细小病毒抗体ELISA检测方法的建立与应用
2016-06-17李晓波王淑菁岳秉飞贺争鸣中国食品药品检定研究院北京100050
付 瑞,李晓波,王淑菁,王 吉,卫 礼,巩 薇,岳秉飞,贺争鸣(中国食品药品检定研究院,北京 100050)
H-1细小病毒抗体ELISA检测方法的建立与应用
付 瑞,李晓波,王淑菁,王 吉,卫 礼,巩 薇,岳秉飞,贺争鸣
(中国食品药品检定研究院,北京 100050)
【摘要】目的 建立H-1细小病毒抗体的ELISA检测方法,并进行初步应用。方法 采用大鼠神经胶质瘤细胞C6培养大鼠H-1细小病毒,制备包被抗原,采用纯化后抗原建立该病毒的ELISA检测方法;将建立的方法与国外同类试剂盒进行比对,考察该方法的特异性和灵敏度。同时,应用该方法对35份大鼠血清进行检测。结果所建立的方法可检测出稀释1280倍的阳性血清;与犬细小病毒、小鼠微小病毒和猪细小病毒阳性血清均无交叉反应;与大鼠细小KRV病毒有交叉反应;对35份大鼠血清进行检测,结果均为阴性,与国外同类试剂盒结果一致。结论 所建立的H-1细小病毒ELISA检测方法具有良好的种属特异性和灵敏度,可用于大鼠血清中H-1细小病毒抗体检测。
【关键词】H-1细小病毒;ELISA;抗体检测
大鼠细小病毒(Rat parvovirus,RPV)是对实验大鼠危害最为严重的病毒之一。成年大鼠感染多无临床症状,免疫抑制等因素可激发本病。RPV还可污染肿瘤移植物和细胞系,对实验研究产生严重干扰[1]。Toolan[2]从经大鼠传代的人肿瘤细胞系(HEP-1)分离到第2株大鼠细小病毒,通常称为H-1细小病毒,又称Toolan病毒。H-1细小病毒属于细小病毒科,其天然宿主为大鼠,病毒粒子直径为20~25 nm,为无囊膜单链DNA病毒,其核酸约为5100 nt[3]。
我国实验动物国家标准(GB 14922. 2-2011)规定大鼠细小病毒KRV和H-1株为SPF实验大鼠病毒的必检项目。……
