谭咏梅　杨小军　杜娟　赵望泓　陈晓丹　侯晋.南方医科大学南方医院口腔科；.南方医科大学公共卫生与热带医学学院卫生监测中心，广州 5055；.汕头大学医学院第二附属医院口腔科，汕头 5504



牙龈卟啉单胞菌合成环二腺苷酸的高效液相色谱-串联质谱法定性分析

谭咏梅1杨小军1杜娟2赵望泓1陈晓丹3侯晋1
1.南方医科大学南方医院口腔科；2.南方医科大学公共卫生与热带医学学院卫生监测中心，广州 510515；3.汕头大学医学院第二附属医院口腔科，汕头 515041

[摘要]目的定性检测牙龈卟啉单胞菌（P.gingivalis）是否能产生细菌信号分子环二腺苷酸（c-di-AMP），为探索其在P.gingivalis生命代谢以及牙周炎免疫中的作用奠定基础。方法以P.gingivalis标准菌株ATCC33277为实验菌株，抽提细菌内核酸物质作为样品，配置c-di-AMP标准品，通过高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）和高效液相色谱法（HPLC）对样品进行验证。结果HPLC-MS/MS检出限按照信噪比（S/N）3∶1计算，c-di-AMP标准品出峰的保留时间为7.49 min，P.gingivalis提取物样品在保留时间为8.82 min时有目标峰出现（大于3 S/N）。HPLC检测结果表明，P.gingivalis核酸提取物样品及c-di-AMP标准品均在15.7 min处出现目标峰，且二者的紫外吸收光谱相同。结论牙龈卟啉单胞菌核酸提取物中含有c-di-AMP，牙龈卟啉单胞菌可以合成产生c-di-AMP。

[关键词]环二腺苷酸；牙龈卟啉单胞菌；高效液相色谱-串联质谱法

Supported by: National Natural Science Foundation of China (81500870);President Foundation of Nanfang Hospital, Southern Medical University (2013Z006, 2012C005).Correspondence: Hou Jin, E-mail: houjin@smu.edu.cn.

环二鸟苷酸[bis-（3’-5’）-cyclic dimeric guano-sine monophosphate，c-di-GMP]和环二腺苷酸[bis-（3’-5’）-cyclic dimeric adenosine monophosphate，c-di-AMP]是近年来新发现的，在细菌和古细菌中广泛存在的信号分子[1-2]。目前的研究结果显示，c-di-GMP作为第二信使，在细菌的蠕动、毒力因子的表达、生物膜的形成、细胞周期、细胞间通讯以及细菌对宿主细胞的入侵等过程中发挥着重要的调节作用，是细菌生存和代谢的关键性调节因子之一[3-5]。……