张璇+于庆华+王自远+金垒

摘 要 目的：建立清洁验证中残留物阿哌沙班含量测定的高效液相色谱法。方法：色谱柱为Waters Nova-Pak C18（3.9 mm×150 mm，5 μm），流动相为乙腈-水（30∶70），检测波长280 nm，流速1.0 ml/min，柱温30 ℃，进样量10 μl。结果：阿哌沙班在0.01～20 μg/ml范围内线性关系良好，r2=0.999 2；回收率为75.90%，RSD=2.33%（n=18）。结论：该方法操作简便、结果准确，可以用于清洁验证残留物阿哌沙班的定量分析。

关键词 高效液相色谱法 清洁验证 残留物 阿哌沙班

中图分类号：R973.2； O657.72 文献标识码：A 文章编号：1006-1533（2016）09-0076-03

Determination of apixaban residues in cleaning validation by HPLC

ZHANG Xuan*， YU Qinghua， WANG Ziyuan， JIN Lei

（Shanghai Shyndec Pharmaceutical Co. Ltd.， Shanghai 200137， China）

ABSTRACT Objective： To establish a method for the determination of apixaban residues in the cleaning validation by HPLC. Methods： HPLC was carried out on a Waters Nova-Pak C18 column（3.9 mm×150 mm， 5 μm）with acetonitrilewater （30∶70） as the mobile phase at the detection wavelength of 280 nm and the flow velocity of 1.0 ml/min and the column temperature of 30 ℃ with sample size of 10 μl. Results： The standard curve of apixaban showed a good linear relationship in the range of 0.01 to 20 μg/ml with the correlation coefficient （r2） of 0.999 2. The average recovery of samples was 75.90% with RSD of 2.33% （n=18）. Conclusion： This method is convenient and accurate and suitable for the quantitative determination of apixaban residues in the cleaning validation.

KEY WORDS HPLC； cleaning validation； residue； apixaban

作为Xa因子抑制剂的阿哌沙班是一种用于预防和治疗血栓的新型口服抗凝药物[1]，其制剂阿哌沙班片是我们公司研发中心研制的新药，在上海浦东基地与其他产品共线生产。为确保该产品与其他产品在生产中不造成交叉污染、降低阿哌沙班片的生产对其他产品造成的质量风险，本研究参考GMP验证要求确定了阿哌沙班片清洁验证设备残留限度（86 μg/25 cm2）后[2-3]，参考药典要求[4]、根据活性物阿哌沙班的结构特征和HPLC测定特点建立了阿哌沙班的残留物HPLC分析方法，通过对阿哌沙班片生产用设备清洁验证的检验，确定该方法可以用于阿哌沙班片在生产过程清洁验证中的残留物检测，保证清洁验证的准确性，并对每个验证参数设立可接受标准，结果表明高效液相色谱法（HPLC）简便，准确，可在清洁验证中用于阿哌沙班残留物的定量分析。

1 试验仪器与试验样品

高效液相色谱仪LC20AD（日本岛津公司），电子天平（瑞士Mettler XS205），阿哌沙班对照品（批号：1403008，含量：99.47%，上海现代制药股份有限公司），乙醇（AR，国药集团化学试剂有限公司），乙腈（HPLC纯，默克公司）。……