张敏娜,罗声栋，胡　燕，貌盼勇△

(中国人民解放军第三○二医院:1.感染性疾病诊疗与研究中心；2.临床研究管理中心，北京 100039)



·论著·

人上皮细胞黏附分子的真核表达及鉴定

张敏娜1,罗声栋2，胡燕2，貌盼勇2△

(中国人民解放军第三○二医院:1.感染性疾病诊疗与研究中心；2.临床研究管理中心，北京 100039)

摘要:目的构建人上皮细胞黏附分子(EpCAM)全基因的真核表达质粒，研究其在HepG2细胞中的表达。方法将EpCAM 基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)，构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-EpCAM，转染人肝癌HepG2细胞。通过免疫荧光、Western Blotting及流式细胞检测对转染后细胞内EpCAM蛋白的表达进行鉴定。结果双酶切鉴定结果表明重组质粒构建成功。免疫荧光、Western Blotting及流式细胞检测结果一致表明，转染后EpCAM基因在HepG2细胞中表达成功。结论成功构建了人EpCAM 的真核表达载体，并在HepG2细胞中表达，为研究高表达人EpCAM的肝癌细胞的功能打下基础。

关键词:人上皮细胞黏附分子；真核表达；载体

人上皮细胞黏附分子(EpCAM) 是最早在结肠癌中发现的一种跨膜糖蛋白，也是第一个用单克隆抗体技术鉴定出来的人肿瘤相关抗原[1]。EpCAM 广泛表达于上皮来源的正常组织[2]，并在多种上皮源性癌组织中不同程度的过表达[3]。已被多项研究证实与肿瘤的诊断和预后密切相关。在肝细胞癌中，虽然EpCAM 表达率较低，但由于近年来的研究认为EpCAM 为肝癌干细胞标记，而受到越来越多的关注[4]。本研究对人肝细胞癌组织来源的EpCAM 全基因序列在肝癌细胞系中进行了真核表达研究，为探讨高表达EpCAM的肝癌细胞功能打下基础。……