刘书敏,冯小娟

(江苏省连云港市东方医院检验科，江苏连云港 222042)



·临床研究·

246株尿培养病原菌的分布与耐药性分析

刘书敏,冯小娟

(江苏省连云港市东方医院检验科，江苏连云港 222042)

摘要:目的分析该院2013年1月至2014年12月门诊和住院泌尿系统感染患者尿培养中病原菌的分布及耐药情况，为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法采用Microscan auto SCAN-4 细菌鉴定和药敏分析系统进行菌株鉴定和药敏试验，应用WHONET 5．5软件统计分析病原菌的分布及耐药情况。结果594份中段尿培养标本共分离病原菌246株，阳性率为41.41%。其中革兰阴性菌157株(63.82%)，革兰阳性菌67株(27.24%)，真菌22株(8.94%)。分离的革兰阴性菌中,以大肠埃希菌最为常见；而在革兰阳性菌中以肠球菌属为主，屎肠球菌最常见；真菌感染的数量亦明显增加。结论革兰阴性菌仍是泌尿系感染的主要病原菌，临床医生应根据尿培养药敏结果合理使用抗菌药物，减少耐药菌株产生。

关键词:泌尿系统；尿培养；病原菌；药敏试验；耐药分析

泌尿系统感染是临床最常见的感染性疾病之一。而尿培养是诊断泌尿系感染的最直接手段，随着现代医学的快速发展，抗菌药物的广泛应用，耐药菌株的不断增多，使许多病原菌的耐药性越来越高，给临床治疗带来困难[1]。为掌握本院泌尿系统感染病原菌的分布及耐药情况，为临床医生合理选用抗菌药物提供依据，研究者对本院2013年1月1日至2014年12月31日送检的594份尿标本进行培养、鉴定和耐药分析。现报道如下。

1材料与方法

1.1标本来源收集本院2013年1月1日至2014年12月31日门诊和住院泌尿系统感染患者送检的尿培养标本，包括中段尿和导尿等共594份，分离到病原菌246株。

1.2仪器与试剂应用Microscan auto SCAN-4 细菌鉴定分析仪进行菌株鉴定及药敏试验(PC33、NC50细菌鉴定药敏板及配套试剂均购自美国德灵公司)。血平板、麦康凯平板以及念珠菌显色平板均购自郑州安图生物工程有限公司。常用质控菌株大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、金黄色葡萄球菌ATCCATCC25923、粪肠球菌ATCC29212,均购自卫生部药品鉴定所。药敏纸片和药敏培养基MH琼脂均购自杭州天和生物试剂有限公司。

1.3方法按全国临床检验操作规程留取清洁中段尿标本,采用10μL定量接种的方法，接种于血琼脂平板、麦康凯平板以及念珠菌显色平板上。置5%～10% CO235 ℃培养18～24 h，观察菌落生长情况，尿培养阳性的标准是革兰阴性菌大于105cfu/mL，革兰阳性菌大于104cfu/mL，同时去除相同患者重复分离的菌株，细菌培养及鉴定均按《全国临床检验操作规程》进行[2]。

1.4细菌鉴定及药敏试验应用Microscan auto SCAN-4细菌鉴定分析仪进行菌株鉴定及药敏试验，严格按Microscan auto SCAN-4 细菌鉴定分析仪操作手册进行操作。阳性菌株进行革兰染色、触酶及氧化酶试验。触酶阳性的革兰阳性菌接种PC33鉴定药敏板，革兰阴性菌接种NC50鉴定药敏板。35 ℃非CO2培养箱中培养16～24 h。滴加相应试剂后，放入AS-4细菌鉴定药敏分析仪判读结果。

1.5超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的测定依据2013年CLSI M100 S23推荐的方法及标准进行判读,用头孢噻肟(30 μg)和头孢噻肟/克拉维酸(30/10 μg)、头孢他啶(30 μg)和头孢他啶/克拉维酸(30/10 μg)双纸片确证法。结果以2个药物中有任何一个，在加克拉维酸后，抑菌环直径与不加克拉维酸的抑菌环相比，增大值大于或等于5 mm时，判定为产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)。

1.6统计学处理用世界卫生组织细菌耐药性监测中心推荐的WHONET5.6软件进行菌株及耐药性统计。

2结果

2.1菌株构成594份中段尿培养标本共分离病原菌246株，阳性率为41.41%，与邵敏伟等[3]报道的42.8%相接近。其中检出革兰阴性菌157株(63.82%)，革兰阳性菌67株(27.24%)，真菌22株(8.94%)。革兰阴性菌中,以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌最为多见；而在革兰阳性菌中以屎肠球菌和粪肠球菌为主，真菌以白色念珠菌和光滑念珠菌多见。泌尿道病原菌检出前三位的细菌分别为大肠埃希菌，肺炎克雷伯菌，屎肠球菌，具体比率见表1。

表1　246株病原菌种类分布

2.2病原菌对抗菌药物的耐药率分离率前5位的革兰阴性菌和革兰阳性菌细菌药敏试验结果见表2。

表2　分离率在前5位的革兰阴性菌和革兰阳性菌对常用抗菌药物的耐药率(%)

续表2　分离率在前5位的革兰阴性菌和革兰阳性菌对常用抗菌药物的耐药率(%)

-：无数据。

2.3产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌的检出率共检出ESBLs细菌61株，大肠埃希菌、肺炎克雷伯和变形杆菌中分别检出ESBLs细菌57株、4株和0株，检出率分别为60.0%、23.5%和0.0%。

3讨论

泌尿系感染是常见的感染性疾病之一，近年来，随着抗菌药物的发展，以及抗菌药物的广泛应用，泌尿系感染检出的耐药菌株也越来越多，发病率也明显增高，其发病率仅次于呼吸道感染，占医院感染的第2位[4]。

泌尿系感染的主要病原菌是革兰阴性菌，尤以大肠埃希菌为最多。本次研究表明， 594份中段尿培养标本共分离病原菌246株，阳性率为41.41%。其中革兰阴性菌157株(63.82%)，革兰阳性菌67株(27.24%)，真菌22株(8.94%)，与文献报道相接近[5]。而检出的革兰阴性菌中,以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌最为多见；而在革兰阳性菌中以屎肠球菌和粪肠球菌为主，真菌以白色念珠菌和光滑念珠菌多见。表1、2显示，本次分析的尿培养标本中共分离出95株大肠埃希菌，居各类病原菌的首位，其中产ESBL菌株者占60%。而产ESBL菌株对大多数抗菌药物的耐药性均高于非产ESBLs菌株。由表2可见，无论是产ESBLs还是非产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌及变形杆菌，它们对碳青霉烯类都高度敏感，敏感率均为100.0%，表明碳青酶烯类仍是治疗肠杆菌科细菌最有效的抗菌药物[6]。含酶抑制剂的抗菌药物对大肠埃希菌也较敏感，耐药率在15.0%左右。其次为阿米卡星和头孢西丁，耐药率分别在16.3%和18.6%。本次监测结果显示，大肠埃希菌对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率分别达68.7%和63.8%，高于同类文献报道的53.6%和52.4%[7]，可能与喹诺酮类药物是广谱抗菌药物，因其不良反应低，使用方便，临床医生在治疗时使用频率很高，不少患者也将其视作抗菌药物中的“非处方药”来使用有关，致使其耐药性呈上升趋势。因此，临床医生在治疗大肠埃希菌引起的尿路感染时应慎重且不宜将喹诺酮类药物用作经验用药，应根据尿培养的药敏结果合理使用抗菌药物。铜绿假单胞菌对多数抗菌药物的耐药率相对较低，多在20.0%～30.0%。本次监测显示在尿路感染病原菌中占第2位的是屎肠球菌，占12.26%，表明屎肠球菌是引起本地区尿路感染革兰阳性菌的主要细菌。屎肠球菌对青霉素类、喹诺酮类、红霉素类的耐药率均大于88.0%，喹奴普汀/达福普汀的耐药率为10.3%，呋喃妥因的耐药率为24.0%，未检出耐万古霉素、达托霉素和利奈唑胺的肠球菌株，提示这3种药物是治疗泌尿系肠球菌感染的有效药物。但因呋喃妥因的价格低廉且敏感性高的特点，经验用药可作为首选药物[8]。此外，本次检出真菌22株，占8.94%，这与长期大量使用抗菌药物，导致机体正常菌群失调有关。因此对免疫力低下的患者，和使用广谱、高效抗菌药物的患者应注意是否出现真菌引起的二重感染。

综上所述，本地区泌尿系感染病原菌以大肠埃希菌和屎肠球菌为主，且耐药性已相当严重，临床医生在对泌尿系感染患者使用抗菌药物治疗前，应及时做尿细菌培养鉴定和药物敏感试验，根据药敏结果合理选用抗菌药物，以达到良好的治疗效果和减少耐药菌株的产生。

参考文献

[1]彭兰,陈孝进.泌尿系感染病原菌及耐药性调查[J].中华医院感染学杂志,2006,16(1):110-111.

[2]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].3版.南京:东南大学出版社,2006:743-744．

[3]邵敏伟,梁艳,周庭银.2 991份中段尿培养病原菌种类分布与耐药性分析[J].中华医院感染学杂志,2009,19(15):2044-2047.

[4]王健,方玲妹,李奕萍.尿路感染病原菌及其耐药性的调查分析[J].中华医院感染学杂志,2010,20(1):125-126.

[5]周晓燕,赵梅,李莎莎,等.8 850份尿培养中病原菌的分布及耐药性分析[J].宁夏医科大学学报,2014,36(10):1111-1114.

[6]马瑛.126例尿培养的结果分析[J].贵阳中医学院学报,2012,34(2):53-55.

[7]蔡焕荣.876株尿培养的细菌分布及耐药性分析[J].海南医学,2011,22(4):110-112.

[8]孟祥博,刘光标,陈丽娜,等.脑卒中住院康复患者尿路感染病原菌的分布及耐药性[J].中国康复理论与实践,2011,17(10):993-996.

(收稿日期：2015-12-18)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.09.060

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)09-1282-04