卵巢癌SKOV3细胞系培养上清液处理巨噬细胞不同时间后对巨噬细胞分化的影响
2016-06-01宋玉霞赵涛张玮璨郭清王宏卫孟桐羽
宋玉霞 赵涛 张玮璨 郭清 王宏卫 孟桐羽
050011 河北省石家庄市第一医院妇产科(宋玉霞、赵涛、郭清、王宏卫、孟桐羽);河北医科大学(张玮璨)
·论著·
卵巢癌SKOV3细胞系培养上清液处理巨噬细胞不同时间后对巨噬细胞分化的影响
宋玉霞赵涛张玮璨郭清王宏卫孟桐羽
050011河北省石家庄市第一医院妇产科(宋玉霞、赵涛、郭清、王宏卫、孟桐羽);河北医科大学(张玮璨)
【摘要】目的探讨卵巢癌SKOV3细胞系培养上清液处理巨噬细胞不同时间后,巨噬细胞分化亚型的改变。方法Ficoll 密度梯度法分离健康成人外周血单个核细胞,GM-CSF诱导为巨噬细胞(M0)后,用对数生长期的SKOV3细胞培养上清液处理为实验组,用1640培养基处理为对照组,分别于培养第7天和第14天光学显微镜下观察巨噬细胞形态变化;流式细胞术检测实验组和对照组在不同时间后巨噬细胞表面细胞因子(CD64、CD163)表达情况。结果培养第7天时,实验组巨噬细胞形态改变明显,细胞突起增加,细胞变细长,对照组细胞形态无明显变化,实验组CD64-M1型巨噬细胞所占比例高于对照组,CD163-M2型巨噬细胞所占比例低于对照组(P<0.05);培养第14天时,实验组巨噬细胞形态逐渐恢复,对照组细胞形态仍无明显变化,实验组CD64-M1型巨噬细胞所占比例低于对照组,CD163-M2型巨噬细胞所占比例高于对照组(P<0.05)。实验组CD64-M1型巨噬细胞在第7天时M1/M0水平高于第14天,CD163-M2型巨噬细胞在第7天时M2/M0低于在第14天,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论SKOV3细胞培养上清液可改变巨噬细胞形态,激活巨噬细胞免疫反应,随着时间的推移,细胞形态恢复,发生免疫抑制;同时,也可促进巨噬细胞分化,随着时间的推移,亚型也有不同,主要由CD64-M1型巨噬细胞向CD163-M2型巨噬细胞转变。
【关键词】卵巢肿瘤;SKOV3;巨噬细胞;细胞分化
上皮性卵巢癌(简称卵巢癌)是女性生殖系统常见的恶性肿瘤。由于缺乏早期特异性症状、无有效的疾病筛查手段,> 70%的病例确诊时已是FIGO Ⅲ/Ⅳ 期的晚期癌症患者,表现为腹腔内广泛播散和转移。慢性炎症能够促进肿瘤的发生发展,并诱发不同类型的癌症。炎症微环境还有利于肿瘤细胞穿过基底膜,进而发生侵袭和转移[1],因此近年来的一些研究集中于肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associateed macrophages,TAMs)。肿……
