任海霞 杨鹏 郭惠东 任鹏飞 李瑾 宫志远

摘要：采用单因素试验和正交试验对黑曲霉FSDZH-l摇瓶发酵生产纤维素酶的营养条件进行优化。结果表明：其最佳培养基配方（g/L）为：玉米粉40.0，蛋白胨3.0，（NH₄）₂SO₄2.0，Na₂HPO₄0.5，MgSO₄0.2，FeS04·7H₂O0.1，CaCO₃0.5。在最佳培养基条件下，发酵液酶活力可达315.6U/mL。

关键词：黑曲霉；纤维素酶；培养基；优化

中图分类号：S182

文献标识号：A

文章编号：1001-4942（2016）01-0067-04

纤维素是地球上分布最广的碳水化合物，同时又是自然界中数量最大的可再生资源 。在工业、农业和生活废料中，纤维素含量占有相当大的比重。我国是农业大国，每年产生农作物秸秆7亿吨左右，目前这些秸秆通常被大量焚烧，不仅污染环境，而且浪费资源 。利用微生物降解纤维素因具有效率高、无污染、作用条件温和、节约等优点而成为当前热点之一，具有很大的应用潜力 。利用微生物处理纤维素其核心技术是优良的纤维素酶生产菌株及其产酶技术 。而产酶过程是非常复杂的生物化学反应过程，因此，研究菌体的代谢规律以及影响菌体产纤维素酶的各种营养因素和环境因素非常重要。本研究主要采用单因素试验和正交试验对影响产酶的各营养成分进行分析，以获得黑曲霉产纤维素酶的最佳培养基。

1 材料与方法

1.1 菌种

黑曲霉（Aspergillus niger）FSDZH-1，本实验室保藏。

1.2 主要原料和试剂

小麦粉、玉米粉、玉米浆、豆粕粉、羧甲基纤维素钠（美国Sigma公司），其它化学试剂。

1.3培养基及发酵条件

1.3.1 斜面培养基PDA培养基

1.3.2 初始产酶培养基 淀粉3g，Na₂HPO₂0.1g， NaNO₃0.5g，CaCO₃0.05g，MgSO₄0.015g，Fe-SO₄·7H₂O0.005g，水100mL，pH 7.0，121℃灭菌20min。

1.3.3 发酵条件将斜面菌种制成孢子悬液，接种于80mL基本培养基（500mL三角瓶）中，接种量为7.5×10⁴孢子/mL发酵液，30℃、200r/min摇瓶培养32h。……