蔬菜农药残留速测酶制剂的比较

2016-05-24沈群超吴碧波胡雅花

浙江农业科学 2016年4期

关键词：农药残留比较

金彬，沈群超，吴碧波，胡雅花

(1.宁波市农业生产安全管理总站,浙江宁波 315012; 2.慈溪市农业监测中心,浙江宁波 315300; 3.宁海县农林科教信息中心,浙江宁波 315600)

蔬菜农药残留速测酶制剂的比较

金彬1，沈群超2，吴碧波3，胡雅花1

(1.宁波市农业生产安全管理总站,浙江宁波 315012; 2.慈溪市农业监测中心,浙江宁波 315300; 3.宁海县农林科教信息中心,浙江宁波 315600)

摘要：以2种品牌酶制剂为样本,使用小青菜、青瓜、韭菜3种蔬菜作为供试样品,通过实验室内部、实验室外部比较发现,青菜、黄瓜样品对酶抑制法检测判定基本没有干扰,但韭菜因汁液中含有对酶有影响的植物次生物质,需整株提取。不同厂家研发的酶制剂对具体农药品种的特异性有差异,且普遍对毒死蜱的检测灵敏度较低,采购仪器和酶制剂时需根据实际需要,选择对重点监控农药残留指标灵敏度高的产品,建议对同一样品分别使用几种品牌的酶制剂进行检测以满足监测需要。

关键词：酶抑制法;农药残留;比较

文献著录格式:金彬,沈群超,吴碧波,等.蔬菜农药残留速测酶制剂的比较[J].浙江农业科学,2016,57 (4):517-519.

农药残留是影响蔬菜质量安全的重要因素,直接关系到广大消费者的身体健康,受到社会各界的广泛关注[1]。酶抑制法农药残留快速检测方法因其操作简单、快速、成本低、比较实用等优点,成为目前基层农产品质量安全检测机构广泛使用的农药残留检测方法[2]。2014年,全面开展农产品质量安全保障行动成为浙江省政府的十件实事之一,其中一项内容就是所有县(市、区)都要建成农产品安全快速检测室,并对公众免费开放[3]。酶抑制法速测对操作人员、场地条件的要求较低,更重要的是检测时间短、能够达到现场快速出结果的需求,对滥用高毒农药的不法商贩有较大的威慑力[4-5]。酶抑制法利用农药对胆碱酯酶的抑制作用及胆碱酯酶催化水解物与显色剂反应产生黄色物质的特性,用速测仪在410 nm等特定波长处测定吸收度随时间的变化值,最终得出抑制率[6]。但酶抑制法农残检测有其局限性[7],且现在市场上速测产品品牌、型号众多,性能各有不同[6-7],选择合适的速测产品是开展速测监管必须考虑的事项。本项目通过实验室内部、实验室外部比较,得出2种不同品牌农残速测试剂盒对几种农药残留检测的灵敏度和检测结果的准确性,以期为提高农药残留速测工作的质量提供参考依据。

1　材料与方法

1.1材料

选择市场上在售的2种酶制剂,仪器使用北京瑞利谱创仪器技术有限公司的RP410型速测仪,酶制剂均为乙酰胆碱酶,分别为上海捷门保林迈生物工程有限公司生产(T1)和北京瑞利谱创仪器技术有限公司生产(T2)。选择小青菜(叶菜类)、青瓜(瓜类)、韭菜(葱蒜类) 3种蔬菜作为供试样品。

1.2样品处理

小青菜取叶片部分。青瓜沿皮削下1片,各用天平准确称取1 g,用剪刀剪成1 cm见方的大小,加入5 mL缓冲溶液,震荡2 min。韭菜的汁液中含有影响乙酰胆碱酶的物质,容易引起假阳性,因此直接将整枝浸入5 mL缓冲溶液中。分别添加9种农药残留,每组做3个平行,加标浓度和2个品牌酶制剂的理论检出限见表1。

1.3方法

按厂家提供的仪器使用说明书和农药残留快速检测试剂盒使用说明书进行空白测试和样品测试。由宁波市种植业管理总站实验室(B1)和慈溪市农业监测中心实验室(B2)承担比对试验。

表1　样品加标浓度和试剂盒理论检出限

2　结果与分析

2.1不同样品的加标检测情况

在青瓜、青菜、韭菜样品中加入一定浓度的农药,由B1实验室承担检测。从表2得出,加入同样浓度的农药标准溶液,对3种蔬菜抑制率判断得出的结果不尽相同。添加比试剂盒理论检出限高出5倍以上的农药,如敌敌畏、灭多威、甲萘威和克百威,3种蔬菜在2个实验室的检测结果均为阳性,无疑议。杀螟硫磷添加试剂盒理论检出限浓度的量,3种蔬菜均显示假阴性;氧化乐果、毒死蜱添加检出限浓度的量,出现不同的判断结果,但与具体样品类型没有绝对的关联;马拉硫磷和甲胺磷添加了低于检出限浓度的量,已有样品出现阳性结果,但也有样品出现阴性结果,阳性的判断结果偶然性概率较高。因此,试验所用的3种蔬菜对仪器检测性能并无影响,检测判定结果主要还是由仪器性能和酶制剂本身对农药的特异性决定,样品所含农药浓度越高于试剂盒检出限,得到阳性结果越稳定(表2)。但很多文献提出葱蒜类、香菜、番茄、胡萝卜、茭白、蘑菇、花椒等农产品的汁液中含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性[8]。因此,大多试剂盒说明书会建议处理这类样品时,采取整株蔬菜(或大块蔬菜)浸出提取液的方法。对叶绿素含量较高的蔬菜也可采取类似方法。但也有厂家研发了抗干扰的新型仪器和配套的固化酶制剂,如SN-V生物传感器型农药残留检测仪[8],其具体性能还需进一步考证。

表2　不同样品的加标速测判断结果

将韭菜准确称取1 g,用剪刀剪成1 cm左右长度;另准备1份韭菜按照试剂盒说明书,取整枝浸泡,比较2种处理方法的抑制率,每种处理方式做3个平行。结果显示,切碎的韭菜3个平行样品抑制率均＞50%,样品判断为阳性;整枝浸提则3个平行样品的抑制率均＜50%,样品判断为阴性。可见韭菜切碎后的抑制率明显高于整枝提取的抑制率,切碎后的韭菜样品易检测得出假阳性结果(表3)。

表3　韭菜不同样品制备方法对检测结果的影响

2.2不同品牌试剂盒的检测准确性

比较2个品牌试剂盒对5种农药残留的检测准确性可知,T1对克百威、甲萘威的检测灵敏度高于其他2种仪器,但对毒死蜱、甲胺磷灵敏度不高,易出现假阴性; T2对甲胺磷的检测灵敏性高于其他2种仪器,但对克百威、毒死蜱、甲萘威灵敏度不高。

相比GB 2763—2014中规定的蔬菜中农药最大残留限量值,T1对敌敌畏、克百威、甲萘威较为敏感,可对标准规定的最低限量浓度做出准确判断,毒死蜱在理论检测限加标浓度下检测结果显示为假阴性,检测能力并不如生产厂家所述灵敏度,对甲胺磷的检测能力无法满足GB 2763—2014的要求。T2对甲胺磷的敏感度略高于T2,但仍难以满足国标要求。其他4项农药的检测情况同T1 (表4)。

表4　仪器灵敏度比较

毒死蜱是广谱性农药,目前在蔬菜、水稻生产中使用广泛,也是较多检出的农药品种之一[10-11],但如T1,T2一般,大多数酶抑制法农残速测仪和配套的试剂盒对毒死蜱的检测能力都比较低[7,12],假阴性率较高,无法实现有效的监控。目前也有品牌对毒死蜱有较好的敏感性。戴慧峰等[13]验证了博纳CL-BIII型农残速测仪的性能,认为该仪器对毒死蜱有较高的灵敏度。

3　小结与讨论

本试验以2种农药残留速测试剂盒为样本,通过实验室内部、实验室外部比较,得出2个品牌试剂盒检测结果的准确性和对几种农药残留检测的灵敏度。结果表明,青菜、黄瓜对检测结果基本无干扰,检测判定结果主要还是由仪器和酶制剂本身对农药的特异性决定,但韭菜汁液中含有对酶有影响的植物次生物质,切碎后浸提检测产生了假阳性,需整株提取,类似韭菜的香菜、番茄等也需采取同样的处理方法。

本试验所用酶抑制法根据乙酰胆碱酯酶被抑制的程度(抑制率)来检测蔬菜上的有机磷和氨基甲酸酯类农药的残留,具有快速方便、前处理简单、成本较低等优点,能对有农药残留的蔬菜进行粗筛,将一部分农药残留含量较高的蔬菜控制在市场之外。但根据试验的结果,不同厂家研发的酶制剂对具体农药品种的特异性有差异,有的对克百威、甲萘威的检测灵敏度高,有的对甲胺磷的检测灵敏性高。所以,采购酶制剂时需根据实际需要,选择对重点监控农药残留指标灵敏度高的产品。但若要扩大检测项目范围,建议对同一样品分别使用多个厂家的酶制剂进行检测。酶抑制剂普遍对毒死蜱的检测灵敏度较低,需继续开发特异性酶制剂。

除产品品牌、样品种类等会对检测结果产生影响外,操作时,培养温度、酶的活性、样品测试速度、比色皿洁净度和仪器的维护等都会影响试验结果[14-15],需操作人员注意。

参考文献:

[1]丁常荣,曹学文.农产品中农药残留现状及对策[J].广东农业科学,2005 (3):82,101.

[2]扶继军.酶抑制率法农残速测技术及常见问题探究[J].农业与技术,2014 (2):29-32.

[3]浙江各地农产品安全快速检测室3月底前免费对公众开放[EB/OL]. (2014-02-14).http://zjnews.zjol.com.cn/system/2014/02/14/019860322.shtml.

[4]黄德聪,李悦.简述基于酶抑制法的农药残留快速检测仪器现状及评价[J].农业与技术,2015,35 (8):243.

[5]韩萍.酶抑制法在蔬菜农药残留检测上的应用[J].蔬菜,2014 (11):85-87.

[6]邱静.我国主要农药残留快速检测方法及产品现状分析[J].农产品质量与安全,2011 (5):41-46.

[7]叶雪珠,王强,赵首萍,等.酶抑制法检测蔬菜农药残留的效果评价[J].中国蔬菜,2013 (4):76-81.

[8]中华人民共和国商务部网站报道我司仪器的应用[EB/OL].(2015-06-12).http://sh-linmo.com.cn/index.php? _ m = mod_article&_a = article_content&article_id =120.

[9]张海霞.不同型号农药残留速测仪比对[J].吉林蔬菜,2014 (3):29-30.

[10]周华,汪尤刚,边天斌,等.2009—2012年衢州市售蔬菜中有机磷农药残留分析[J].中国卫生检验杂志,2013,23 (9):2144-2145.