雷微　邓明明

(四川医科大学附属第一医院消化科, 四川 泸州 646000)



·论著·

miR-217通过靶向14-3-3ν抑制胃癌转移的作用及机制研究*

雷微邓明明

(四川医科大学附属第一医院消化科, 四川 泸州 646000)

【摘要】目的探讨miRNA-217(miR-217)抑制胃癌细胞转移的作用及其机制。方法qRT-PCR法比较胃癌组织、癌旁组织、胃癌细胞系和正常胃上皮细胞中miR-217的表达差异。转染miR-217 mimics或Inhibitors后，通过Transwell侵袭实验观察miR-217的胃癌细胞转移能力的影响；建立裸鼠尾静脉转移模型，观察稳定表达miR-217在体内对胃癌转移能力的影响；生物信息学分析miR-217的候选靶基因为14-3-3ν，荧光素酶报告基因实验检测SGC7901细胞中miR-217过表达对野生型和突变型14-3-3ν荧光素酶活性的影响。Western blot检测miR-217对14-3-3ν野生型和突变体蛋白表达的影响。结果miR-217在胃癌组织中的表达明显低于癌旁组织(P<0.01)；在各胃癌细胞中的表达量较正常胃上皮细胞GES显著降低(P<0.01)。miR-217 mimics抑制SGC7901细胞的侵袭能力，与阴性对照的差异有统计学意义(P<0.01)。而miR-217 inhibitors明显促进SGC7901细胞的侵袭能力(P<0.01)；体内实验发现稳定过表达miR-217的SGC7901细胞转移能力明显降低。荧光素酶报告基因结果证实miR-217能够抑制14-3-3ν的3′-UTR区荧光素酶活性；Western blot结果显示转染miR-217后，SGC7901细胞中的14-3-3ν蛋白水平明显低于对照组；Western blotting结果显示miR-217过表达显著抑制14-3-3ν-wt，而不能抑制14-3-3ν-mut的蛋白表达。结论miR-217能够通过靶向14-3-3ν抑制胃癌转移，促进miR-217的表达或抑制14-3-3ν的表达可能是抑制胃癌转移的有效手段。

【关键词】胃癌；转移；微小RNA；微小RNA-217；14-3-3ν

胃癌是我国的主要恶性肿瘤之一，占肿瘤相关死亡人数占42.5%，是各类癌症死亡率的第三位[1]。大多数患者发现胃癌时已发生临近器官或者远处转移，成为胃癌患者的主要死因。微小RNA(miRNA，miR)，即20-24个核苷酸的是近年来发现的一类通过与靶基因的mRNA发生特异性结合而发挥转录后负性调控作用的非编码小RNA[2]。多种miRNA已被证实通过调控下游靶基因，在胃癌侵袭和转移恶性生物学行为中发挥关键作用[3, 4]。有研究发现miR-217能够靶向KRAS抑制胰腺癌生长[5]，miR-217还能够靶向E2F3抑制肝癌转移[6]。然而，miR-217在胃癌中的作用尚不清楚。本研究通过探索miR-217在胃癌转移过程中的作用及其分子机制，为抑制胃癌转移提供新的有效治疗靶点。……