施伎蝉 蒋贤高 余志杰 宁洪叶 何贵清 吴正兴 蔡玉伟 程爱琼



应用反向斑点杂交技术快速检测结核分枝杆菌耐药性

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全国第五次结核病流行病学抽样调查资料显示，我国15岁以上人群活动性、凃阳和菌阳肺结核的患病率分别为459/10万、66/10万和119/10万，Mtb耐多药率为6.8%[1]。近年来，流动人口的增加、诊断治疗的延误和抗结核药物的滥用等原因导致耐药菌株的增加，造成耐多药结核病(MDR-TB)的流行[2]。多重耐药Mtb的出现、临床缺乏有效的耐药菌株检测手段和尚无新的抗结核药物出现等原因，使患者错过了最佳的治疗时机，增加了耐药菌株的传染机会。因此，对Mtb的快速诊断及寻找有效的耐药检测方法成为了迫切的需求。

反向斑点杂交技术是一种可以简单、快速检测基因突变和基因缺失的技术手段。本研究应用反向斑点杂交技术检测温州地区Mtb临床分离菌株及其对4种一线抗结核药物耐药相关的基因突变(利福平耐药基因rpoB、异烟肼耐药基因katG和inhA、链霉素耐药基因rpsL、乙胺丁醇耐药基因embB)，并与液体培养药物敏感性试验(简称“药敏试验”)结果进行对比，探讨其在检测Mtb及耐药性方面的临床应用价值。

材料和方法

一、患者来源

选取2013年11月至2014年10月在温州市中心医院感染科就诊的93例门诊和住院复治肺结核患者作为研究对象，其中男78例，女15例，平均年龄(48.0±12.5)岁。复治肺结核诊断标准参照文献[3]，即：(1)初治失败的患者；(2)规则用药满疗程后痰菌复阳的患者；……