(1. 中国科学院 成都有机化学研究所，四川 成都 610041； 2. 中国科学院大学，北京 100049)

·制药技术·

银杏酸的合成新方法

赵剑阳1,2， 王 婷1,2， 刘情情1,2， 朱 槿1， 黄晴菲1*， 王启卫1

(1. 中国科学院 成都有机化学研究所，四川 成都 610041； 2. 中国科学院大学，北京 100049)

报道了一种合成银杏酸类化合物的新方法。以2-羟基-5-甲基苯甲酸为起始原料，经甲基化和溴代反应后，通过Wittig反应构建不同链长侧链合成了2-甲氧基-6-十三碳-1-烯基苯甲酸甲酯(6a)和2-甲氧基-6-十五碳-1-烯基苯甲酸甲酯(6b)；用钯碳氢化还原6中的碳碳双键后脱除甲基合成了两种不同链长银杏酸，总收率分别为46%和40%，其结构经1H NMR和ESI-MS确证。

2-羟基-5-甲基苯甲酸; 银杏酸； Wittig反应； 脱甲基； 药物合成

银杏酸是银杏中除银杏内酯和银杏黄酮外的又一种活性物质，主要存在于银杏外种皮中[1]。通常研究的银杏酸类化合物是C-6位被不同链长烷基或烯基取代的水杨酸衍生物，取代烷基或烯基由13～17个碳原子组成[1]。因其具有强烈的杀虫[2]、抑菌杀菌[3]、消炎、抗过敏及抗肿瘤[4]等活性而被广泛应用于植物农药的开发和新药的研究中。银杏酸主要从植物中提取，来源十分有限，且难以分离纯化[1]，因此研究其化学合成具有重要意义。目前，银杏酸的合成方法报道较少，合成总收率较低，制备成本较高，不易大批量生产。

本文参考文献[5-7]方法，以2-羟基-5-甲基苯甲酸(2)为起始原料，经甲基化、溴代丁二酰亚胺(NBS)溴代制得2-溴甲基-6-甲氧基苯甲酸甲酯(4)；通过Wittig反应构建C-6位取代侧链合成了2-甲氧基-6-十三碳-1-烯基苯甲酸甲酯(6a)和2-甲氧基-6-十五碳-1-烯基苯甲酸甲酯(6b)；用钯碳氢化还原6中的碳碳双键后脱除甲基合成了两种不同链长银杏酸(1a和1b, Scheme 1)，总收率分别为46%和40%，其结构经1H NMR和ESI-MS确证。

Scheme 1

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

Bruker-300型核磁共振仪(CDCl3为溶剂，TMS为内标)；Agilent 1100LC/MSD型质谱仪。

薄层层析和柱层析用硅胶，山东青岛海洋化工厂；钯碳催化剂，阿尔法试剂公司；其余所用试剂均为分析纯。

1.2 合成

(1) 3的合成

在反应瓶中加入2 6.34 g(41.88 mmol)和丙酮100 mL，搅拌下加入碳酸钾17.34 g(125.46 mmol)，硫酸二甲酯12.60 g(99.90 mmol)和四正丁基碘化胺0.77 g(2.09 mmol)，回流反应至终点(TLC监测)。减压蒸除溶剂，残留物经硅胶柱层析[洗脱剂：A=V(石油醚)/V(乙酸乙酯)=30/1]纯化得黄色油状物2-甲氧基-6-甲基苯甲酸甲酯(3)6.63 g，收率88%;1H NMRδ： 7.21～7.27(m， 1H)， 6.80(d，J=7.7 Hz， 1H)， 6.76(d，J=8.4 Hz， 1H)， 3.91(s， 3H)， 3.82(s， 3H)， 2.28(s， 3H)。表征数据与文献[8]报道一致。

(2) 4的合成

在反应瓶中加入3 0.54 g(3.00 mmol)和四氯化碳10 mL，搅拌下加入溴代丁二酰亚胺(NBS)0.54 g(3.03 mmol)和过氧化苯甲酰(BPO)0.036 g(0.15 mmol)，回流至反应终点(TLC监测)。冷却至室温，依次用饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤，减压蒸除溶剂，残留物经硅胶柱层析(洗脱剂：A=30/1)纯化得黄色油状物2-甲氧基-6-溴甲基苯甲酸甲酯(4)0.57 g，收率74%；1H NMRδ： 7.35(t，J=6.7 Hz， 1H)， 7.00(d，J=7.7 Hz， 1H)， 6.99(d，J=8.4 Hz， 1H)， 4.49(s， 2H)， 3.96(s， 3H)， 3.84(s， 3H)。表征数据与文献[8]报道一致。

(3) 5的合成

在反应瓶中依次加入4 2.68 g(10.40 mmol)，乙腈30 mL和三苯基膦2.72 g(10.40 mmol)， N2保护，搅拌下回流反应至终点(TLC监测)。冷却至室温，冰浴冷却下加入乙醚，搅拌，过滤，滤饼干燥得白色固体3-甲氧基-2-甲氧羰基苄基三苯基溴化膦(5)4.88 g，收率97%，未经纯化直接进行下步反应。

(4) 6的合成(以6a为例)

在反应瓶中加入5 1.12 g(2.47 mmol)和干燥THF 15 mL， N2保护，搅拌下于-40 ℃加入双三甲基硅基胺基锂3.0 mL(2.96 mmol)的THF(5 mL)溶液，恒温反应1.5 h；缓慢加入十二醛0.55 g(2.96 mmol)的THF(5 mL)溶液，加毕，恒温反应1 h；于0 ℃反应1 h；于室温反应10 h(TLC监测)。加水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并萃取液，干燥，浓缩，残留物经硅胶柱层析(洗脱剂：A=50/1)纯化得无色油状液体6a 0.72 g。

用类似的方法合成无色油状液体6b。

6a： 收率84%;1H NMRδ： 7.26～7.33(m， 1H)， 7.10(d，J=7.9 Hz， 1H)， 6.80(d，J=8.2 Hz， 1H)， 6.22～6.36(m， 2H)， 3.91(s， 3H)， 3.83(s， 3H)， 2.10～2.19(m， 2H)， 1.26～1.48(m， 18H)， 0.88(t，J=6.6 Hz， 3H)。表征数据与文献[7]报道一致。

6b： 收率88%；1H NMRδ： 7.25～7.30(m， 1H)， 7.10(d，J=7.9 Hz， 1H)， 6.77(d，J=8.2 Hz， 1H)， 6.15～6.32(m， 2H)， 4.40(s， 3H)， 3.88(s， 3H)， 2.05～2.30(m， 2H)， 1.26～1.45(m， 22H)， 0.88(t，J=6.6 Hz， 3H)。表征数据与文献[7]报道一致。

(5) 7的合成(以7a为例)

在反应瓶中加入6a 1.43 g(4.30 mmol)， 10%钯碳0.14 g和无水甲醇30 mL，用氢气置换，搅拌下于室温反应至终点(TLC监测)。用硅藻土过滤，滤液减压蒸除溶剂得2-甲氧基-6-十三烷基苯甲酸甲酯(7a)1.43 g。

用类似方法合成2-甲氧基-6-十五烷基苯甲酸甲酯(7b)。

7a： 白色固体，收率99%；1H NMRδ： 7.24～7.29(m， 1H)， 6.82(d，J=7.7 Hz， 1H)， 6.76(d，J=8.4 Hz， 1H)， 3.91(s， 3H)， 3.82(s， 3H)， 2.52(t，J=8.0 Hz， 2H)， 1.17～1.25(m， 22H)， 0.88(m， 3H)。表征数据与文献[9]报道一致。

7b： 白色固体，收率98%；1H NMRδ： 7.23～7.29(m， 1H)， 6.82(d，J=7.7 Hz， 1H)， 6.75(d，J=8.3 Hz， 1H)， 3.90(s， 3H)， 3.82(s， 3H)， 2.22(t，J=7.8 Hz， 2H)， 1.17～1.25(m， 26H)， 0.88(m， 3H)。表征数据与文献[9]报道一致。

(6) 8的合成(以8a为例)

在反应瓶中加入7a 2.47 g(7.10 mmol)和无水甲醇15 mL，搅拌下加入氢氧化钠4.05 g(101.25 mmol)水(18 mL)溶液和二甲亚砜15 mL，回流反应至终点(TLC监测)。用1 mol·L-1盐酸调至pH 2，用二氯甲烷萃取，合并萃取液，干燥，浓缩得2-甲氧基-6-十三烷基苯甲酸(8a)2.08 g。

用类似方法合成2-甲氧基-6-十五烷基苯甲酸(8b)。

8a： 白色固体，收率99%；1H NMRδ： 7.26～7.34(m， 1H)， 6.87(d，J=7.8 Hz， 1H)， 6.81(d，J=8.4 Hz， 1H)， 3.89(s， 3H)， 2.73(t，J=7.8 Hz， 2H)， 1.25～1.31(m， 22H)， 0.88(t，J=6.5 Hz， 3H)。

8b： 白色固体，收率93%;1H NMRδ: 7.29～7.35(m， 1H)， 6.88(d，J=7.8 Hz， 1H)， 6.75(d，J=8.4 Hz， 1H)， 3.90(s， 3H)， 2.75(t，J=7.8 Hz， 2H)， 1.25～1.31(m， 26H)， 0.88(t，J=6.5 Hz， 3H)。

(7) 1的合成(以1a为例)

在反应瓶中加入8a 0.19 g(0.56 mmol)和二氯甲烷10 mL， N2保护，搅拌下于-40 ℃加入三溴化硼0.31 g(1.23 mmol)的二氯甲烷(5 mL)溶液，恒温反应1 h；于0 ℃反应1 h；于室温反应2 h(TLC监测)。冰浴冷却下加水淬灭反应，有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，干燥并浓缩得白色固体1a 0.16 g。

用类似方法合成1b。

1a： 白色固体，收率88%；1H NMRδ： 7.31～7.36(m， 1H)， 6.87(d，J=7.8 Hz， 1H)， 6.75(d，J=6.9 Hz， 1H)， 2.96(t，J=7.9 Hz， 2H)， 1.19～1.25(m， 22H)， 0.88(t，J=6.5 Hz， 3H); ESI-MSm/z: 319.227 2{[M-H]-}。表征数据与文献[6,9]报道一致。

1b： 白色固体，收率78%；1H NMRδ： 7.31～7.36(m， 1H)， 6.83(d，J=7.8 Hz， 1H)， 6.75(d，J=6.9 Hz， 1H)， 2.93(t，J=7.9 Hz， 2H)， 1.19～1.25(m， 26H)， 0.88(t，J=6.5 Hz， 3H); ESI-MSm/z: 347.258 7{[M-H]-}。表征数据与文献[6,9]报道一致。

银杏酸类化合物的合成中，C-6位取代侧链的构建是关键。本文采用经典的Wittig反应构建取代侧链，取得良好的效果。

在6的合成中，按文献方法反应时间长、条件苛刻，且对于13个碳以上侧链反应效果不好，推测文献中所用的三乙胺碱性不强，对于长链脂肪醛反应活性不够。故我们采用碱性更强的双三甲基硅基胺基锂在-40 ℃反应条件下，缓慢滴加入长链脂肪醛，控制滴加速度，尽可能减少副反应，然后梯度升温，高收率地制得6a和6b。此外，采用甲基保护酚羟基的策略，操作简单，脱保护工艺成熟，后处理简单，收率较高。

设计以2-羟基-6-甲基苯甲酸为起始原料，经七步反应了两种不同链长银杏酸，总收率分别提高至46%和40%。该方法操作简单，各步反应收率高，适合大量制备，为银杏酸类化合物的制备提供新的方法。

[1] 张裴，刘前，童元峰，等. 银杏酸单体的合成及构效关系研究进展[J].天然产物研究与开发,2010, 22:343-345，322.

[2] Kubo I, Komatsu S, OchiMatsuda M. Molluscicides from thecashew anscardium occidentale and their large-scale isolation[J].J Agric Food Chem,1986,34:970-973.

[3] Piao R， Zhao H， Jin D. Studies on allelopathy of extraction solution of pulstilla chiensis on plant[J].J Anhui Agric Sci,2007,35:3808-3809.

[4] Sun X， Mao Y. Aritifically synthesized of effective element of ranuneaceal plant-protoanemonin and tested of biological activity[J].J Anhui Univ,1991,1:65-70.

[5] Furstner A， Seidel G. Shortcut syntheses of naturally occurring 5-alkylresorcinols with DNA-cleaving properties[J].J Org Chem,1997,62:2332-2336.

[6] Kubo I， Muroi H， Himejima M. Structure-antibacterial activity relationships of anacardic acids[J].J Agric Food Chem,1993,41:1016-1019.

[7] Zhang P， Mao Z， Yu P,etal. Synthesis of ginkgolic acid analogues and evaluation of their molluscicidal activity[J].Molecules,2011,16:4059-4069.

[8] Mandal S， Roy S. Titanocene(III) chloride mediated radical-induced synthesis of 3,4-dihydroisocoumarins:Synthesis of (±)-hydrangenol，(±)-phyllodulcin，(±)-macrophyllol and (±)-thunberginol G[J].Tetrahedron,2008,64:11050-11057.

[9] Zehnter R， Gerlach H. Synthesis of anacardic acids[J].Liebigs Ann,1995(12):2209-2220.

A Novel Synthetic Method for Ginkgolic Acid

ZHAO Jian-yang1,2, WANG Ting1,2, LIU Qing-qing1,2,ZHU Jin1, HUANG Qing-fei1*, WANG Qi-wei1

(1. Chengdu Institute of Organic Chemistry, Chinese Academy of Sciences, Chengdu 610041, China;2. University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China)

A novel method for the synthesis of the ginkgolic acid was reported. 2-Methoxy-6-tridec-1-enylbenzoic acid methyl este(6a) and 2-methoxy-6-pentadec-1-enylbenzoic acid methyl ester(6b) were synthesized by methlation,N-bromosuccinimide substitution and constructing different long chain olefins via Wittig reaction from 2-methy-5-hydroxy benzoic acid. Two ginkgolic acids with different long chains were synthesized by reduction of carbon carbon double bond of 6 with palladium carbon then demethylating, the total yield were 46% and 40%, respectively. The structures were confirmed by1H NMR and ESI-MS.

2-methy-5-hydroxy benzoic acid; ginkgolic acid; Wittig reaction; demethylation; drug synthesis

2015-11-30;

2016-02-08

成都市高新区创新创业人才奖

赵剑阳(1989-)，男，汉族，湖北咸宁人，硕士研究生，主要从事有机合成研究。 E-mail: zhaojianyang13@163.com

黄晴菲，助理研究员， Tel. 028-85238597, E-mail: qfhuang@cioc.ac.cn

O625.5; R914.5

A

10.15952/j.cnki.cjsc.1005-1511.2016.04.15395