郎莉莉，高　玉，葛茸茸，陈建梅，景　明



siRNA抑制缺氧诱导因子-1ɑ表达对人视网膜母细胞瘤细胞增殖与凋亡的影响

郎莉莉，高玉，葛茸茸，陈建梅，景明

［摘要］目的观察siRNA抑制人视网膜母细胞瘤表达低氧诱导因子(HIF)对细胞增殖和凋亡的影响。方法以Y-79细胞系为研究对象，分别在正常氧和低氧环境下培养，MTT法检测细胞增殖，RT-PCR和Western blot检测HIF-1ɑmRNA和蛋白质水平的表达变化，siRNA抑制细胞表达HIF-1ɑ，膜联蛋白V-FITC和PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡情况，荧光评估测定法检测半胱天冬酶活性。SPSS 16．0软件包作统计学分析，配对t检验。结果与常氧和低氧环境培养Y79细胞比较，在0、4、8、12 h后HIF-1ɑmRNA和蛋白质数倍高表达。siRNA干扰技术处理24、48、72 h后，常氧环境培养下的Y-79细胞表达HIF-1ɑ呈时间依赖性轻度下降趋势，低氧条件下呈显著下降。siRNA HIF-1ɑ可能是通过上调Bax/Bcl-2比率和活化caspase-9、caspase-3途径促进Y-79细胞凋亡。结论siRNA HIF-1ɑ下调人视网膜母细胞瘤表达低氧诱导因子，可抑制细胞增殖和促进细胞凋亡。抑制HIF-1ɑ表达可能是治疗视网膜母细胞瘤的潜在新策略。

［关键词］低氧诱导因子-1ɑ;人视网膜母细胞瘤;细胞增殖;细胞凋亡

［作者单位］200120上海，同济大学附属东方医院眼科(郎莉莉、陈建梅)，解放军第四一一医院眼科(高玉、葛茸茸、景明)

视网膜母细胞瘤(retinoblastoma，RB)是婴幼儿最常见的眼内恶性肿瘤，其发病率约为1/15 000～20 000，严重威胁和危害患儿的视力甚至生命［1-2］。随着对RB认识的不断深入，其诊断和治疗正在发生着快速的变化［3］。除了传统的眼球摘除术和外放射治疗，过去的十年里，系统性化疗已成为了首选的治疗手段［4-5］。……