郭健+曹珂+朱更瑞+方伟超+陈昌文+王新卫+关利平

摘要： 以龙1-2-3、龙1-2-4、龙1-2-6、北京晚蟠桃、96-2-51、96-2-43各3份蟠桃和圆桃为试验材料，利用间接酶联免疫法（ELISA）测定果实顶部和中部中果皮生长素（IAA）、细胞分裂素（ZR）、赤霉素（GA3、GA4）4种植物内源激素的含量；以中蟠桃10号和中桃红玉为试验材料，研究果实发育过程中内源激素的含量变化。结果表明，多数圆桃果实IAA、GA4含量显著高于蟠桃，且3份圆桃种质果实顶部的GA4含量明显高于中部；同一时期，圆桃、蟠桃果实的ZR、GA3含量基本无差异；较其他激素而言，在整个发育期果实IAA含量相对较高。IAA、GA4对蟠桃、圆桃果实发育及果形形成具有非常重要的影响。

关键词： 蟠桃；圆桃；果实；植物激素；果实发育；果形；中果皮；IAA；赤霉素

中图分类号： S662.101 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2016）03-0196-04

植物激素与果实发育密切相关，生长素（IAA）与细胞分裂素（ZR）被认为是调控果实发育过程的主要植物激素[1]，Pattison等认为，番茄果实发育过程中生长素浓度存在明显差异，果实中心部位IAA浓度高于中果皮[2]。赤霉素（GA3、GA4）亦具有促进番茄果实坐果及果实发育的功能，研究表明，在番茄花后8 d及成熟前15 d，赤霉素含量存在高峰，与细胞分裂及膨大有关[3]。玉米素类细胞分裂素在葡萄细胞分裂与果实发育中具有显著作用[4]。大量研究表明，生长素、细胞分裂素、赤霉素在果实生长发育过程中起重要作用[5]。

桃果实生长曲线属双“S”形，在花后子房迅速膨大为第Ⅰ期；果实生长缓慢期、核木质化开始，这是胚的生长高峰期，为第Ⅱ期；果实第2次迅速生长，细胞体积增长、果肉厚度明显增加，直至果实成熟，为第Ⅲ期。研究认为，蟠桃的纵径在第Ⅰ期、第Ⅲ期显著小于圆桃，侧径没有差异；在整个发育过程中，蟠桃的纵径是圆桃的60%左右[6]。

桃果形具有扁平形（蟠桃）与圆形（普通桃）2种主要类型，该性状由1对等位基因控制，其中扁平形（S）对圆形（s）为显性[7]。果实发育与植物内源激素也具有密不可分的关系，不同果形桃品种果实的生长发育与主要激素的作用关系尚未清楚。目前，桃果形的研究主要集中于果形基因的定位，而未见果形形成生理机制以及蟠桃、圆桃横轴与纵轴方向细胞分裂、膨大等调控的相关报道。本试验通过测定2种不同果形桃品种果实发育期不同部位生长素、细胞分裂素及赤霉素的含量，比较其差异，从生理水平初步探讨导致果形出现差异的原因，研究植物内源激素对果形形成的作用，以确定导致桃果形差异的主要内源激素。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验材料均来自中国农业科学院郑州果树研究所国家桃种质资源圃。采集龙1-2-3、龙1-2-4、龙1-2-6、北京晚蟠桃、96-2-51、96-2-43共6个桃品种硬核后、未成熟前果实顶部与中部的中果皮果肉，研究果实不同部位的内源激素含量。以中蟠桃10号（蟠桃）、中桃红玉（圆桃）2个桃品种为试验材料，采集果实第1次快速生长期（S1）、硬核期（S2）、第2次快速生长期（S3）、生理成熟期（S4）共4个时期的中果皮果肉，不区分部位，研究不同果形桃品种果实发育过程中的激素含量变化；中桃红玉4个采样时间分别是4月22日（花后30 d）、5月12日（花后50 d）、5月28日（花后65 d）、6月14日（花后85 d）；中蟠桃10号4个采样时间分别是4月22日（花后30 d）、5月28日（花后65 d）、6月14日（花后 85 d）、7月9日（花后110 d）。液氮速冻，于超低温冰箱中保存、备用。

1.2 测定方法

采用间接酶联免疫法[8]测定，测定的激素种类包括生长素（IAA）、细胞分裂素（ZR）、赤霉素（GA3、GA4），ELISA试剂盒由中国农业大学提供。

1.3 数据分析

利用 Excel 2007和SPSS 13.0软件进行统计分析。

2 结果与分析

2.1 果实IAA含量差异分析

IAA具有促进细胞分裂、果实发育的作用。由图1可见，圆桃、蟠桃各3个共6个桃品种中，圆桃、蟠桃果实均未表现出明显的顶部IAA含量高于或低于中部的变化规律；3个圆桃果实的IAA含量几乎全部显著高于蟠桃，其果实整体的平均IAA含量高于蟠桃，为蟠桃的3倍。这说明IAA在促进圆桃果实沿纵轴方向生长发育的作用方面强于蟠桃，IAA可能促进了圆桃果实顶部细胞的分裂与膨大，而使圆桃形成圆形的果实。

由图2可见，随果实生育期发展，IAA含量变化整体呈下降趋势；与中蟠桃10号相比，中桃红玉果实在S1—S2发育前期维持相对较高浓度的IAA，在S2—S3时期果实IAA含量高于中蟠桃10号，这表明果实发育过程中，有一段时间（S2—S3时期）圆桃果实的IAA含量高于蟠桃。

2.2 果实ZR含量差异分析

ZR是细胞分裂素中的1种，也具有促进细胞分裂的作用。由图3可见，不同品种果实顶部与中部的ZR含量各不相同，无论是圆桃还是蟠桃，同一个品种果实顶部与中部ZR含量差异不显著；圆桃果实平均ZR含量为蟠桃的2倍，相比于IAA的3倍，差异相对较小。由图4可见，果实生长发育过程中，中蟠桃10号、中桃红玉果实的ZR含量均逐渐降低，在果实相同发育时期，两者果实的ZR含量无显著性差异。这说明ZR在促进圆桃与蟠桃果实发育过程中的作用基本相同，并不是造成果形差异的主要因素。

2.3 果实GA4含量差异分析

GA4具有促进细胞分裂、伸长及膨大的作用。由图5可见，6个桃品种中，圆桃果实顶部的GA4含量显著高于果实中部，龙1-2-3、龙1-2-4、龙1-2-6果实顶部的GA4含量分别是果实中部的2.3、1.5、1.6倍；蟠桃果实顶部与中部的GA4含量没有与圆桃类似的变化规律，且果实顶部与中部GA4含量差异不显著。3个圆桃的GA4平均含量比蟠桃高78%。

由图6可见，随果实生育期发展，中蟠桃10号、中桃红玉果实的GA4含量变化呈相反趋势，并非整个发育期圆桃的GA4含量都高于蟠桃；在S2—S3时期，中桃红玉果实的GA4含量高于中蟠桃10号，这段时期恰好也是圆桃果实IAA含量高于蟠桃的时期；果实同一发育时期，中蟠桃10号在发育前期（S1）的GA4含量显著高于中桃红玉，是其1.8倍；中蟠桃10号硬核期果实的GA4含量显著下降，下降幅度为50%，后趋于稳定；在发育前期至硬核期，中桃红玉果实的GA4含量维持较高水平，后下降并趋于稳定。

2.4 果实GA3含量差异分析

由图7可见，6个桃品种中，无论圆桃还是蟠桃，果实顶部GA3含量整体上未明显表现出高于或低于果实中部的变化规律，圆桃与蟠桃果实的GA3整体平均含量相差不大，圆桃果实GA3平均含量仅比蟠桃高18%，相对于IAA、GA4、ZR，其含量变化在圆桃、蟠桃中差异最不明显。由图8可见，随果实生育期发展，GA3含量变化整体呈下降趋势；在相同发育时期，圆桃、蟠桃果实的GA3含量差异不显著。因此，GA3在果形形成过程中的地位与ZR相同，仅作为果实发育过程中需要的一种内源激素，并不是影响果形产生差异的主要原因。

3 结论与讨论

植物激素对果实的生长发育及成熟具有重要作用，授粉受精是果实发育的第一步，也是最重要的一步，受精后的子房产生大量的植物激素，进一步促进子房壁及植物其他器官的生长发育[9]。有研究表明，种子中生长素和细胞分裂素的增加，促进了果实细胞分裂及细胞膨大[10]。桃果实的生长发育及桃圆、扁不同果形的形成也应该受到各种植物激素的广泛作用，前人研究多集中在测定桃果实软化与激素的关系、蟠桃裂果与激素的关系及缝合线变软与激素的关系等[11-13]。有研究指出，果实内源激素含量的不均匀会导致苹果果实的偏斜，即产生非正常果形的果实[14]，通过外施IAA、BA、GA3等激素，可以降低苹果果实的偏斜[15]。前人对苹果正常果与畸形果内源激素的含量进行分析认为，内源激素的差异是导致畸形果出现的一个重要因素，畸形果中的内源激素含量普遍低于正常果[16]。同样，梨果实偏斜也是由于内源激素含量不均匀引起的[17]。另外，有研究表明，外施赤霉素可以促进番茄形成单性结实的果实，且与正常授粉受精后发育的果实基本相同[18]。闫国华等认为，赤霉素可能参与促进苹果细胞伸长，进而影响果实发育的生物学过程[19]。

相比圆桃，蟠桃果形扁平的性状是否也是由于内源激素分布不均匀而导致的？本试验从果实顶部与中部等不同部位着手，分别测定3种圆桃、3种蟠桃果实顶部与中部主要的内源激素含量，分析导致蟠桃、圆桃果形形成差异的生理因素。结果表明，6份桃种质中，无论果实顶部或中部，圆桃果实的IAA、GA4含量要明显高于蟠桃，而相对于圆桃，蟠桃是一种果形变扁的“畸形果”，这与激素含量差异引起畸形果实产生的结论[14，16]较为一致。圆桃果实顶部与中部GA4含量的显著差异及圆桃、蟠桃整体平均GA4水平的差异，反映圆桃果实顶部较高浓度的GA4促进了果实顶部的细胞伸长、细胞分裂等，使果实具有向上生长、膨大的能力，并最终表现出圆桃的果形特点。对于蟠桃而言，由于GA4分布不规律，且GA4含量整体低于圆桃，则表现出区别于圆桃的果形特点。

在桃整个生长发育过程中，测定2个不同果形桃品种果实的4种主要植物内源激素含量发现，IAA含量在果实发育初期较高，并随果实发育逐渐降低，这与Boettcher 等研究结论[20-21]较为一致；在发育S2—S3时期，中桃红玉果实的IAA含量高于中蟠桃10号，这说明圆桃在形成圆形果实过程中，一段时间内较高浓度的IAA促进了圆形果实的正常发育；中蟠桃10号与中桃红玉果实的GA4含量变化差异相对较大，两者GA4含量变化呈相反趋势，这说明在形成不同果形果实的过程中，GA4确实起到极其重要的作用，与Serrani等研究结论[22]趋于一致；同一时期，圆桃、蟠桃果实的ZR、GA3含量差异不明显，这2种激素在圆桃、蟠桃果实发育及果形形成过程中表现较为一致，不是影响果形出现差异的因素。有研究表明，种子是果实中植物激素的主要来源，种子中丰富的植物激素刺激着种子周围组织的快速正常生长[23-24]，苹果果实内含有种子的多少甚至决定着苹果的果形[25]。而蟠桃果核、果实呈扁平状，发育过程中容易出现裂核、裂果等极端类型[6]，这些潜在的特点可能对激素的产生及运输产生影响，从而导致对果形的形成产生影响。

因此，本研究初步认为，IAA、GA4共同参与调控桃果实发育过程中果形的形成，其中IAA通过在一定时期内不同类型果中的浓度差异，决定果形的形成；而GA4一方面通过不同浓度决定果形，另一方面通过圆桃中果实顶部与中部的浓度差异决定圆桃果形的形成。但是，这2种激素如何具体调控果实生长发育，进而形成不同圆、扁形状的桃果实还有待于进一步研究。

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