响应面法优化怀山药水溶性蛋白提取工艺的研究
2016-05-02付琴琴
◎付琴琴
(晋中市粮油检测中心,山西 晋中 030600)
山药为薯蓣科薯蓣属植物薯蓣块茎,为药食同源保健食品,具有降血糖血脂、抗肿瘤、抗突变、抗氧化、免疫调节等功能[1]。学者们对本土山药研究较多,如蛋白体内和体外抗氧化活性[2]、免疫调节活性及对血管紧张素转化酶的非竞争性抑制作用[3]。国内学者研究主要集中于山药种植技术、多糖提取及活性及深加工[4]等领域。本实验以怀山药(Dioscorea opposita polysaccharide,DOPS)为原料,研究其水溶性蛋白质的提取工艺。
1 材料与方法
1.1 材料与设备
怀山药,产自河南温县;浓硫酸、氢氧化钠、盐酸等试剂均为分析纯。
SPD80型凯氏定氮仪,北京三品科创仪器有限公司;DS-1型高速组织捣碎机,上海双旭电子有限公司;DZKW-4型水浴锅,北京中兴伟业仪器有限公司。
1.2 测定方法
蛋白含量的测定均采用凯氏定氮法。
蛋白提取率=(提取液中蛋白浓度/山药汁中蛋白浓度)×100%。
1.3 实验方法
1.3.1 山药汁样品制取和山药蛋白提取
怀山药表面清洗擦净,去皮,均浆,得到山药汁样品。取上述样品10 mL于三角瓶,按一定水料比加入蒸馏水,一定温度下提取一定时间,4 000 r/min离心10 min,取上清液。分别取10 mL山药汁样品和10 mL提取液进行凯式定氮试验。
1.3.2 蛋白质含量的测定
蛋白含量[4](g/mL)

式(1)中,V:消耗HCl,mL;V0:空白实验时消耗的HCl,mL;N:HCl当量浓度;A:固定系数,6.25;W:样品体积,mL。
2 结果与分析
2.1 山药汁样品蛋白含量测定结果
测定V为0.53 mL,V0为0.1 mL,N 为 0.01 mol/L。带入公式(1)得山药汁中蛋白质含量为0.376 mg/mL。
2.2 单因素试验
2.2.1 水料比选择试验
提取温度55 ℃,提取时间60 min,水料比分别2∶1、4∶1、6∶1、8∶1、10∶1和12∶1,提取1次,比较水料比对提取效果影响,结果如图1所示。……
