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靶向 PDGF受体-α的 RNA干扰对 RPE细胞增殖和凋亡的影响

2016-04-27秦贤杰彭燕一

安徽医科大学学报 2016年2期
关键词:实验检测

秦贤杰,彭燕一,秦 程

靶向 PDGF受体-α的 RNA干扰对 RPE细胞增殖和凋亡的影响

秦贤杰,彭燕一,秦 程

目的探讨针对血小板源性生长因子受体-α(PDGFR-α)的 RNA干 扰 对 体 外 培 养 的 人 视 网 膜 色 素 上 皮(hRPE)细胞增殖和凋亡的影响,为临床治疗增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)提供实验依据。方法利用脂质体将合成的 shRNA转染体外培养的 hRPE细胞,MTT法检测 hRPE细胞增殖活性;RT-PCR法检测细胞中 PDGFR-αmRNA的表达;Western blot法 检 测 PDGFR-α蛋 白 表 达 水 平;Hoechst 33258荧光染料核染分析细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率。结果PDGFR-αshRNA作用 hRPE细胞 24~72 h后,细胞增 殖 明 显 受 到 抑 制,呈 时 间 剂 量 效 应 (P<0.05);PDGFR-αshRNA作 用 hRPE细 胞 48 h后,实 验 组PDGFR-α基因 mRNA和蛋白的表达水平较空白对照组及阴性对照组明显降低(P<0.05);实验组细胞的凋亡率分别为(37.10±0.55)%、(50.8±1.41)%,与空白对照组(11.7± 1.11)%及阴性对照组(13.5±1.05)%相比,差异有统计学意义(P<0.05);实验组 G1期细胞百分比分别为(64.76± 1.16)%、(75.64±0.93)%,与 空 白 对 照 组 (54.51± 1.40)%及阴性对照组(56.04±2.19)%相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PDGFR-αshRNA能抑制 hRPE细胞的增殖并诱导其凋亡。

血小板源性生长因子受体-α;RNA干扰;视网膜色素上皮细胞;增殖;凋亡

增殖性玻璃体视网膜 病 变 (proliferative vitreoretinopathy,PVR)是指增生的纤维膜对视网膜神经上皮层前后面的收缩、牵拉所导致视网膜脱离、失明的一种疾病,视网膜色素上皮 (retinal pigment epithelium,RPE)细胞在纤维膜的形成、收缩过程中起着重要的作用[1]。血 小板 源 性 生 长 因 子 (platelet derived growth factor,PDGF)是机体内一种重要的促使细胞生长、分化的生长因子。研究[2]表明,PDGF对诱发 RPE细胞的增殖、移行,最终导致 PVR的发生和发展起着重要的作用。玻璃体内许多非 PDGF家族的因子均可激活 PDGF受体(PDGFR),采用中和 PDGF的方法来治疗 PVR所取得的效果并不理想。……

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