蔡蔚然　郑贵亮#　葛萨萨，2　张国平　周义德



·实验研究·

Nrf2及其信号通路相关因子在噪声性聋大鼠耳蜗的表达△

蔡蔚然1郑贵亮1#葛萨萨1，2张国平1周义德1

【摘要】目的研究Nrf2/Keapl-ARE信号通路相关因子核因子2(nuclear factor E2 related factor 2，Nrf2)、超氧化物歧化酶1(superoxide dismutas 1，SOD1)、血红素加氧酶1 (heme oxygenase- 1，HO-1)在噪声致聋大鼠耳蜗的表达变化。方法SD大鼠30只，随机分为噪声组15只和正常对照组15只。正常对照组不给予噪声暴露，噪声组动物给予连续12小时115 dB SPL的稳态白噪声暴露，分别于噪声暴露后1、3、7天对两组动物进行ABR和DPOAE检测，并于噪声暴露7天后取耳蜗组织运用RT-PCR技术及Peggy Sue微量蛋白检测技术检测Nrf2、SOD1、HO-1的表达。结果噪声暴露后1、3、7天，噪声组大鼠ABR反应阈均高于正常对照组(P<0.05)，噪声组DPOAE幅值较正常组明显下降(P<0.05)；噪声暴露后7天，噪声组大鼠耳蜗Nrf2、SOD1、HO-1的mRNA表达(1.11±0.05、1.45±0.12、1.15±0.03)上调，高于正常对照组(1.00±0.02、1.10±0.12、0.92±0.08)，差异均有统计学意义(P<0.05)。Peggy Sue微量检测系统检测结果显示噪声组Nrf2及SOD1、HO-1蛋白含量均高于正常组(P<0.05)。结论强噪声暴露后，SD大鼠耳蜗Nrf2基因表达和蛋白含量升高，Nrf2/Keapl-ARE信号通路下游抗氧化酶SOD1、HO-1基因表达和蛋白含量也随即上调，此改变可能对噪声引起的耳蜗内氧化应激损伤有一定的保护作用。

【关键词】噪声性聋；Nrf2；超氧化物歧化酶1；血红素加氧酶1

噪声引起耳蜗内的氧化应激可产生大量活性氧(reactive oxygen species，ROS)，过量的ROS具有细胞毒性，其不仅可以破坏生物膜磷脂、DNA，还可以引起细胞内的钙超载、兴奋性毒性[1]，激活细胞凋亡通路，导致毛细胞凋亡[2]。Nrf2/Keapl-ARE信号通路相关因子核因子2(nuclear factor E2 related factor 2，Nrf2)是调节氧化应激的关键转录因子，广泛存在于体内组织中，其通过与抗氧化反应元件(antioxidant response element，ARE)相互作用，调节下游多种抗氧化酶类基因的转录。Nrf2/Keapl-ARE信号通路在氧化应激防御机制中起着非常重要的作用[2]，研究表明，Nrf2/Keapl-ARE信号通路在老年性聋、药物性聋[3]以及噪声性听力损失中均有一定的保护作用。然而，目前关于Nrf2/Keapl-ARE信号通路在噪声性听力损失的抗氧化应激中的具体机制尚未完全清楚。本研究利用RT-PCR、Peggy Sue超微量蛋白检测系统等分子生物学技术，研究噪声损伤后大鼠耳蜗内Nrf2/Keapl-ARE信号通路及下游抗氧化因子的表达，探讨其在噪声引起的内耳损伤中可能发挥的作用和机制。……