郑华峰　陶晶　张斌　王纯　吴淳

作者单位：518036北京大学深圳医院心内科



·基础研究·

MicroRNA-124抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖及分子机制研究

郑华峰陶晶张斌王纯吴淳

作者单位：518036北京大学深圳医院心内科

【摘要】目的探讨MicroRNA-124(miR-124)对大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用及可能的调控机制。方法选择10只11周龄雄性SPF级自发性高血压大鼠(SHR)作为实验组及同龄的10只SPF级Wistar大鼠(WKY)为对照组。采用组织贴片法原代培养SHR和WKY主动脉平滑肌细胞。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测miR-124在两组主动脉平滑肌细胞间的表达差异。将miR-124 模拟物或模拟物阴性对照转染SHR主动脉平滑肌细胞，分析过表达miR-124对血管平滑肌细胞增殖的影响。通过数据库及生物信息学软件预测miR-124的靶基因，并利用双荧光素酶报告基因系统进行验证。通过qRT-PCR和Western blot检测靶基因Meox2 mRNA及蛋白表达变化。采用RNA干扰技术，观察敲低Meox2表达对血管平滑肌细胞增殖的影响。结果MiR-124在SHR主动脉平滑肌细胞中的表达为WKY主动脉平滑肌细胞的0.22倍(P<0.01)。体外过表达miR-124可明显抑制SHR主动脉平滑肌细胞的增殖。经生物信息学分析及体外双荧光素酶报告基因系统检测，证实Meox2是miR-124的靶基因。过表达miR-124后SHR主动脉平滑肌细胞中Meox2 mRNA的表达为阴性对照组的0.29倍(P<0.01)；Western blot结果显示，Meox2蛋白表达水平亦明显降低。干扰Meox2的表达亦可降低SHR主动脉平滑肌细胞的增殖。结论MiR-124在SHR中表达下调，其可能通过介导Meox2调控主动脉平滑肌细胞的增殖进而抑制高血压病变的发生过程。

【关键词】miR-124；大鼠，近交SHR；主动脉；肌细胞，平滑肌；增殖；Meox2

MicroRNAs(miRNAs)是一类内生性的小分子RNA，导致靶基因mRNA降解和蛋白翻译抑制[1]。近年来越来越多的研究显示，miRNAs在血管重构形成过程中或在调节平滑肌细胞功能方面也发挥着重要作用。

本研究从已发表的原发性高血压miRNAs表达谱芯片挑选出差异表达的miR-124作为研究对象[2-3]。利用原代培养的自发性高血压大鼠(SHR)和Wistar大鼠(WKY)主动脉平滑肌细胞差异表达的miR-124进行实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证和比较，揭示miR-124对SHR主动脉平滑肌细胞增殖能力的影响，初步探索高血压所致血管重构的分子生物学机制。……