周瑞芳，陈宜刚，李晓洁，刁爱芹，于敏

(1江苏省泰州职业技术学院，江苏泰州 225300;2上海市复旦大学医学院分子医学国家重点实验室)



f3b基因表达下调斑马鱼胚胎中枢神经系统olig-2、Huc的表达观察

周瑞芳1，陈宜刚1，李晓洁1，刁爱芹1，于敏2

(1江苏省泰州职业技术学院，江苏泰州 225300;2上海市复旦大学医学院分子医学国家重点实验室)

目的 观察f3b基因表达下调斑马鱼胚胎中枢神经系统少突胶质细胞转录因子2(olig-2)、神经系统特异表达RNA结合蛋白(Huc)的表达情况。方法 将单细胞阶段的斑马鱼胚胎随机分为两组(胚胎数量分别为90枚和85枚)，分别注射针对f3b起始密码区域序列的吗啡啉反义核苷酸(ATG-MO)和作为标准对照的随机序列吗啡啉反义核苷酸(CON-MO)。在CON-MO注射后的斑马鱼胚胎中随机挑选20枚受精后24 h的胚胎作为对照组，在ATG-MO注射后出现特异表型的斑马鱼胚胎中随机挑选20枚受精后24 h的胚胎作为实验组，通过原位杂交的方法检测两组斑马鱼胚胎中枢神经系统olig-2、Huc。结果 实验组、对照组斑马鱼胚胎中枢神经系统olig-2表达评分分别为(1.9±0.4)、(5.6±0.5)分，两组比较，P<0.01。实验组、对照组斑马鱼胚胎中枢神经系统Huc表达评分分别为(6.3±0.6)、(6.5±0.3)分，两组比较差异无统计学意义。结论 f3b基因表达下调斑马鱼胚胎中枢神经系统olig-2表达减弱、Huc表达无明显变化。

f3b基因；斑马鱼胚胎；少突胶质细胞转录因子2；神经系统特异表达RNA结合蛋白

研究[1～4]发现，凝血因子Ⅲ在多种疾病中表达异常，凝血因子Ⅲ基因敲除的小鼠在胚胎期病死率高[5]。斑马鱼是近年来出现的一种良好的模式生物，在胚胎发育期通体透明，便于观测神经系统发育[5]，并且其神经系统发育在进化上与哺乳动物具有高度的保守性。斑马鱼中的凝血因子Ⅲ基因有两个同源基因——凝血因子Ⅲa(f3a)与凝血因子Ⅲb(f3b)[7]。……