柔嫩艾美耳球虫裂殖子对侵入细胞凋亡抑制通路的研究
2016-03-31宋丽聪王黎霞刘新月赵晨璐张建军北京农学院动物科学技术学院北京昌平006北京农业职业学院畜牧兽医系北京房山044
宋丽聪,王黎霞,刘新月,赵晨璐,张建军,安 健(.北京农学院动物科学技术学院,北京昌平006;.北京农业职业学院畜牧兽医系,北京房山044)
柔嫩艾美耳球虫裂殖子对侵入细胞凋亡抑制通路的研究
宋丽聪1,王黎霞2,刘新月1,赵晨璐1,张建军1,安健1
(1.北京农学院动物科学技术学院,北京昌平102206;2.北京农业职业学院畜牧兽医系,北京房山102442)
摘要:为了研究柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenlla)裂殖子入侵宿主细胞后对凋亡诱导的抑制通路,将纯化的裂殖子与牛肾传代细胞(MDBK细胞)共培养1.5 h。用含6%乙醇的完全培养基诱导细胞凋亡2.5 h,通过流式细胞术检测细胞凋亡率。采用标准试剂盒测定Cyto C,Caspase8,Caspase9,Caspase3的活性。流式细胞术结果显示,入侵裂殖子的细胞在诱导凋亡后其凋亡率为4.57%,而未感染的细胞其凋亡率达到23.69%,二者差异显著(P<0.05),诱导凋亡的MDBK细胞早期凋亡率为19.50%,晚期凋亡率为4.19%,而感染裂殖子后诱导凋亡的MDBK细胞其早期凋亡率为3.53%,晚期凋亡率为1.04%,差异显著(P<0.05)。结果表明,裂殖子的入侵不但可以抑制细胞凋亡,还可以延缓细胞进入早期凋亡的时间。试剂盒结果表明,裂殖子使Cyto C,Caspase8,Caspase9的活性下降,而Caspase3没有变化。根据上述结果初步判断,E. tenlla裂殖子抑制MDBK细胞的凋亡是通过线粒体通路。
关键词:柔嫩艾美耳球虫;裂殖子;MDBK细胞;细胞凋亡;通路
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