陈淑瑜，黄轶群，游育红，马旭东

( 1．漳州卫生职业学院药学系、2．福建医科大学附属漳州市医院血液科，福建漳州　363000; 3．福建医科大学药学院，福建福州　350004)



沉默DNMT1基因对Molt-4细胞增殖、凋亡及组蛋白调控的影响

陈淑瑜1，黄轶群2，游育红3，马旭东2

( 1．漳州卫生职业学院药学系、2．福建医科大学附属漳州市医院血液科，福建漳州363000; 3．福建医科大学药学院，福建福州350004)

中国图书分类号: R329．24; R329．25; R341; R342．2; R394. 2; R733. 7

摘要:目的探讨siRNA沉默DNMT1基因对人急性T淋巴细胞性白血病Molt-4细胞增殖、凋亡及组蛋白调控的影响。方法将DNMT1特异性siRNA经LipofectamineTM2000转染Molt-4细胞后，应用RT-PCR检测Molt-4细胞DNMT1 mRNA表达，MTT法绘制细胞生长曲线;流式细胞术分析细胞凋亡。Western blot检测Bcl-2、procaspase-3、P15蛋白表达以及组蛋白甲基化、乙酰化状态的改变。结果DNMT1 siRNA可沉默DNMT1基因的表达，并呈现浓度依赖性;抑制Molt-4细胞增殖，诱导细胞凋亡。经0、30、60、120 nmol·L－1DNMT1 siRNA作用24h后，细胞凋亡率分别为( 4. 27± 1. 42) %，( 15. 25±1. 54) %，( 35. 63±2. 54) %，( 66. 27± 3. 02) %，差异具有统计学意义( P＜0. 05)。DNMT1 siRNA可上调P15的表达;下调Bcl-2、procaspase-3的表达，下调组蛋白H3K9甲基化水平，上调组蛋白H3K4的甲基化水平，而组蛋白H3乙酰化水平无明显变化。结论DNMT1 siRNA可以有效地抑制Molt-4细胞中DNMT1的表达，下调组蛋白H3K9甲基化水平，上调组蛋白H3K4的甲基化水平，从而抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡。

关键词:RNA干扰; DNMT1;组蛋白;乙酰化;甲基化;急性白血病;表观遗传学

马旭东( 1957－)，女，硕士，主任医师，教授，研究方向:血液肿瘤学，通讯作者，Tel: 0596-2082021，Fax: 0596-2593904，E-mail: maxudong005@ hotmail．com

DNA甲基化反应是由DNA甲基转移酶( DNMT)催化的，目前发现的DNMTs家族包括: DNMT1、DNMT2、DNMT3A、DNMT3B以及DNMT3L，其中DNMT1是一种持续性DNA甲基转移酶，维持有丝分裂期DNA的甲基化状态［1－2］。DNA甲基化不仅参与基因表达调控，而且参与肿瘤的发生发展过程，是肿瘤常见表观遗传学改变之一［3］，DNMT成为一个重要的分子靶标，在疾病的治疗和预防中发挥重要作用［4］。……