张另沾，刘　乐，文　曙，赵铁华

( 1．河北师范大学药物研究所，河北石家庄　050024;2．怀化市第一人民医院检验科，湖南怀化　418000)



［D-Ala2，D-Ala5］-脑啡肽及其聚乙二醇修饰对热板致痛小鼠的镇痛作用

张另沾1，刘乐1，文曙2，赵铁华1

( 1．河北师范大学药物研究所，河北石家庄050024;2．怀化市第一人民医院检验科，湖南怀化418000)

中国图书分类号: R-332; R341. 6; R971. 1; R977. 6

关键词:脑啡肽;［D-Ala2，D-Ala5］-脑啡肽;聚乙二醇;化学修饰;镇痛;小鼠

赵铁华( 1957－)，男，硕士，教授，研究方向:多肽设计合成，通讯作者，Tel: 0311-80787425，E-mail: zhaotiehua @ ______163．com

Analgesic activity of［D-Ala2，D-Ala5］-enkephalin and its pegylation to painful mice induced by hot plate

ZHANG Ling-zhan1，LIU le1，WEN Shu2，ZHAO Tiehua1
( 1．Institute of Materia Medica，Hebei Normal University，Shijiazhuang 050024，China; 2．Dept of Laboratory Medicine，NO．1 Hospital of Huaihuay，Huaihua，Hunan 418000，China)

Key words:enkephalin ( ENK) ;［D-Ala2，D-Ala5］-ENK; polyethylene glycol ( PEG) ; conjugation; analgesia; mice

我们曾经报告，相对分子质量2 ku、5 ku 直链甲氧基聚乙二醇( mPEG)修饰的脑啡肽( Tyr-Gly-Gly-Phe-Met，ENK)半衰期延长、清除率下降、镇痛药效增强［1］。在此基础上，本文对D-Ala替换ENK第2、5位氨基酸(［D-Ala2，D-Ala5］-ENK，DADAE)、及其5 ku分子质量mPEG修饰双重结构改造的合成脑啡肽类似物进行了镇痛药效分析。

1　材料与方法

1．1受试化合物化合物A: ENK-Cys-NH2、化合物B: DADAE-Cys-NH2、化合物C: DADAE-Cys( mPEG5000-MAL) -NH2为本实验室采用Fmoc固相法合成，RP-HPLC纯化，质量分数大于0. 95; MS鉴定:化合物A、B分子质量为677 u和631 u，化合物C在5 662 u附近有一组相差44的峰，与预期相符;生理盐水( NS)溶解，0. 45 μm滤膜滤过。吗啡( Mor)为东北第六制药厂生产，批号001009; NS稀释。

1．2仪器智能热板仪: RB-200型，成都泰盟产品。

1．3动物分组及给药KM小鼠，♀，体质量18～22 g［中国医学科学院实验动物研究所繁育场，合格证号SCXK(京) 2004－0001］。按侧脑室和尾静脉途径，分层随机方法分为NS和Mor对照，及化合物A、B、C试验组，每组10只以上;侧脑室给药［1］按3. 1 μmol·kg－1( 0. 2 mL·kg－1)、尾静脉给药按31 μmol·kg－1( 20 mL·kg－1)条件注射受试及对照药，NS组注射相同体质量容积NS。

1．4热板镇痛试验［1］20℃±1℃室温条件，置小鼠于55℃±0. 5℃热板，以接触热板至舔后足所经历时间为痛阈值;剔除痛阈值小于3 s和大于30 s小鼠;观察记录时间点为给药前和给药后15、30、60、120 min。……