陈赛英，苏成芳，朱启江



铜绿假单胞菌联合TP方案化疗对复发性卵巢癌患者免疫功能影响以及疗效观察

陈赛英，苏成芳，朱启江

[摘要]目的：观察铜绿假单胞菌注射液(PA-MASH)联合TP方案化疗对复发性卵巢癌患者免疫功能影响并观察其疗效。方法：复发性卵巢癌患者46例，观察组23例，对照组23例，2组采用相同的化疗方案，观察组加用铜绿假单胞菌注射液，治疗结束后分别检测患者的免疫指标并评价临床疗效。结果：观察组IFN-Γ和IL-2的血清浓度较治疗前升高，IL-4和IL-10的血清浓度降低，治疗前后差异有统计学意义(P<0.05)；观察组治疗后Karnofsky评分显著高于对照组治疗后的评分，明显改善患者的体力状况；观察组的临床总有效率(82%)高于对照组(57%)。结论：铜绿假单胞菌注射液与化疗药物联合使用可以提高患者的细胞免疫功能，改善患者的体力状况，提高临床疗效，是卵巢癌患者理想的辅助治疗药物。

[关键词]卵巢肿瘤; 铜绿假单胞菌注射液; 化疗; 免疫功能; 治疗结果

卵巢癌是因早期无症状，发病时多届晚期，极易复发转移，5年生存率仅为30%~40%[1]。化疗是晚期和复发性卵巢癌的主要治疗手段，在控制腹水以及预防复发的同时也会对机体产生不良反应，进一步的降低机体的免疫功能[2]。铜绿假单胞菌注射液是一种细菌类生物制剂，由灭活的铜绿假单胞菌——敏感血凝菌毛株(PA-MASH)制备而成，能够有效激活人体免疫反应，预防肿瘤的复发与转移。本研究对铜绿假单胞菌联合TP方案化疗对复发性卵巢癌患者免疫功能的影响及其临床疗效进行了观察探讨，旨在为寻找最佳的治疗方案提供可靠依据。

1资料与方法

1.1临床资料我院2008年1月-2012年12月卵巢癌复发腹水患者共46例，均行理想的肿瘤细胞减灭术。其中浆液性囊腺癌18例，粘液性囊腺癌13例，子宫内膜样癌11例，透明细胞癌4例，高分化25例，中分化15例，低分化6例。中位年龄53.2岁。所有患者均经B超和磁共振证实有中等量或大量腹水，连续监测CA125水平3次以上均逐渐升高，腹水脱落细胞学检查证实有肿瘤细胞。所有患者均签署知情同意书。按随机表将患者分为观察组23例(铜绿假单胞菌注射液+TP方案化疗)和对照组23例(单纯TP方案化疗)。 2组患者病例类型和分期情况无显著性差异(P>0.05)，具有可比性。

1.2治疗方法采用紫杉醇静脉化疗(135 mg/m2，第1天)、洛铂(50 mg/m2，第1天)，每21天为1个周期，共4个周期。观察组联合铜绿假单胞菌注射液5 ml(北京万特尔生物制药有限公司生产，规格为每支1.0 ml，每毫升含菌1.6×109~2.0×109，腹腔灌注化疗。首次应用铜绿假单胞菌患者在腹腔化疗前3 h在上臂皮下注射剂量为0.5 ml，观察有无过敏反应，如无过敏反应方可继续使用。

1.3观察指标每个疗程开始前1~2 d行血常规、肝肾功能检查，观察药物毒副反应并记录，化疗开始后每周检查血常规2~3次，在治疗前后盲法进行Karnofsky评分；化疗前后抽取患者静脉血并采用双抗体夹心ELISA(试剂盒购自上海西塘生物科技有限公司)测定患者血清中细胞因子(IFN-Γ，IL-2，IL-4，IL-10)变化情况，观察药物反应，记录不良反应的发生时间、表现、程度、处理经过及转归。

1.4疗效判断根据RECIST1.1[3]方法评价疗效。临床缓解情况分为完全缓解(CR):所有靶病灶消失且淋巴结直径减少到10mm以下；部分缓解(PR):靶病灶最长径之和与基线状态比较减少30%；疾病进展(PD)：靶病灶最长径之和与治疗之后所记录到的最小的靶病灶最长径之和比较，增加20%且靶病灶必须绝对增大5 mm以上或者出现一个或多个新病灶；疾病稳定(SD):靶病灶最长径之和缩小未达部分缓解，或增大未达疾病进展。

1.5统计学方法采用PSS130.软件，计量资料的比较用t检验，计数资料比较用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.12组患者化疗前后外周血细胞因子IFN-Γ，IL-2，IL-4，IL-10水平比较观察组IFN-Γ和IL-2的血清浓度较治疗前升高，而IL-4和IL-10的血清浓度降低，治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05)；对照组IFN-Γ和IL-2的血清浓度较治疗前升高，而IL-4和IL-10的血清浓度降低，治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

±s)

注：与对照组治疗前比较，#P<0.05；与观察组治疗前比较，*P<0.05；与对照组治疗后比较，△P<0.05。

2.22组患者化疗前后Karnofsky评分比较2组化疗前后Karnofsky评分比较，差异有统计学意义(P<0.05)；观察组治疗后Karnofsky评分显著高于对照组治疗后的评分，说明铜绿假单胞菌注射液可以明显改善患者的体力状况。见表2。

组别治疗前治疗后观察组75.20±7.1193.75±6.18*对照组78.20±7.4586.75±8.06*△

注：与对照组治疗前比较，*P<0.05；与对照组治疗后比较，△P<0.05。

2.32组患者临床疗效比较对照组临床CR 2例，PR 11例，总有效率为57%，观察组的临床CR 7例，PR 12例，总有效率为82%，明显高于对照组的57%。见表3。

表3　2组患者临床疗效比较 (n，%)

3讨论

铜绿假单胞菌注射液是铜绿假单胞菌甘露糖敏感血凝菌毛株(PA-MSHA)的制剂，由中国大连医科大学微生物专家牟西亚教授尽40年研发并于1984年4月成功建立。最新研究发现，PA-MSHA不但能激活机体的抗肿瘤免疫反应，其MSHA菌毛上的甘露糖结合蛋白还能与肿瘤细胞表面的甘露糖靶向结合，直接诱导多种肿瘤细胞如乳腺癌、宫颈癌、肝癌、肺癌、结肠癌等肿瘤细胞凋亡[4]。铜绿假单胞菌注射液主要通过激活多种toll样受体，诱导抗原提呈细胞，恢复机体免疫监视功能[5]；另外可以诱导凋亡，改变肿瘤生物学行为，抑制肿瘤细胞的生长与繁殖；并且可以降低肿瘤细胞的侵袭能力，阻止肿瘤细胞播散和转移。

研究证实，肿瘤的发生、发展与机体的免疫功能密切相关，卵巢癌患者机体的免疫功能较正常人低下[6]，在机体的抗肿瘤免疫应答中，存在Th1向Th2漂移造成的细胞免疫抑制状态[7]。IL-2和IFN-γ由Th1细胞分泌，主要调节细胞免疫反应；而IL-4和IL-10由Th2细胞分泌，主要调节体液免疫反应，其中以细胞毒性T细胞(CTL)为效应细胞的细胞免疫是人体最主要的抗肿瘤免疫机制。本研究发现复发性卵巢癌患者化疗前TL-4、TL-10占优势，存在Th2漂移，与以往的研究结果相类似。化疗作为一种重要的治疗手段，在卵巢癌的治疗中具有重要意义，化疗药物均为细胞毒性药物，在杀灭肿瘤细胞发挥治疗作用的同时也对正常细胞具有杀灭作用，使机体原先的免疫抑制状态进一步减弱。

铜绿假单胞菌注射液作为一种非特异性免疫刺激物，用于复发性卵巢癌的辅助治疗，本研究表明，铜绿假单胞菌注射液能明显改善患者的体力状况，对照组治疗后Karnofsky评分与治疗前相比下降，而观察组治疗后显著上升；同时免疫指标结果显示Th1型细胞因子IFN-Γ，IL-2在观察组明显升高(P<0.01)，Th2型细胞因子IL-4，IL-10在观察组明显降低(P<0.01)。研究中应用铜绿假单胞菌注射液后Th1型细胞因子IFN-Γ，IL-2水平升高，而Th2型细胞因子IL-4，IL-10水平下降，说明铜绿假单胞菌注射液能促进免疫反应由Th2型向Th1型转化，显示铜绿假单胞菌注射液增强机体的细胞免疫，从而达到杀灭肿瘤的目的，最终显著的提高了临床化疗疗效。

在临床观察中发现，应用铜绿假单胞菌的观察组复发卵巢癌患者的腹水在化疗后明显消退直至消失，肿瘤标记CA125在化疗2-3个疗程后逐渐降至正常，而对照组仍有8例患者腹水未消失，2组比较差异有统计学意义(P<0.01)。观察组腹腔灌注铜绿假单胞菌后患者会出现不同程度的发烧，腹痛，程度较轻，经对症处理后好转。

总之，使用铜绿假单胞菌联合TP方案化疗可提高临床疗效，对改善患者全身状况，恶性腹水明显有效，且副作用低，是较好的化疗辅助用药，值得临床推广应用。

[参考文献]

[1]德维塔，主编.癌：肿瘤学原理和实践[M].济南：山东科学技术出版社，2001：1550-1588.

[2]杨均.TP方案化疗对上皮性卵巢癌患者免疫功能的影响以及意义[J].中国实验诊断学，2014，18(5)，797-798.

[3]WHO．Handbook for reporting results of cancer treatment[R]．Geneva：W0rld Health Oganization，1979．

[4]刘义冰，胡大利，周雨朦，等.铜绿假单胞菌注射液对多种人恶性肿瘤细胞株的增殖抑制作用[J].中国肿瘤临床，2013,40(12)：694-697.

[5]Hou J,Liu Y,Liu Y,et al.The MSHA strain of Pseudomonas aeruginosa activated TLR pathway and enhanced HIV-1 DNA vaccine immunoreactivity[J]. PLoS One,2012,7(10):47724.

[6]李广太.妇科肿瘤患者外周血淋巴细胞亚群研究进展[J].国外医学·妇科分册，1993,20(32)：192-194.

[7]Matsuda A,Furukawa K,Suzuki H,et al.Does impaired TH1/TH2 balance cause postoperative infectious complications in colorectal cancer surgery[J]．J Surg Res,2007,139(1):15-21.

[作者单位] 解放军第81医院 妇产科，江苏 南京 210029

·论著研究·

Influence of TP regimen chemotherapy with Pseudomonas aeruginosa on immune function and clinical effects in patients with recurrent ovarian cancer

CHENSai-ying,SUCheng-fang,ZHUQi-jiang．

(DepartmentofObstetricsandGynecology,TheNo.81HospitalofthePLA,Nanjing,Jiangsu210029,China)

[Abstract]Objective:To evaluate the influence of TP regimen chemotherapy with Pseudomonas aeruginosa on immune function in patients with recurrent ovarian cancer．Methods:46 patients with recurrent ovarian cancer (23 in the observation group and 23 in the control group)were included.Both groups applied the same chemotherapy,and the observation group was added with Pseudomonas aeruginosa．Immune function,clinical effects and changes of other indicators of patients were measured before and after the treatment.Results:IFN-Γand IL-2 levels were significantly higher while IL-4 and IL-10 levels were significantly lower in the observation group (P<0.05).The patients' physical status after treatment in the observation group was significantly improved，and the score in the observation group was significantly higher than that in the control group(P<0.05).The overall response rate(RR) in the observation group was higher than the control group (82% VS 57%)．There were statistical differences between the two groups (P<0.05).Conclusion:TP regimen chemotherapy combined with Pseudomonas aeruginosa for treatment of recurrent ovarian cancer has obvious effect and low toxicity.The patients' systemic symptom and immune function are significantly improved．PA-MASH has been proved to be an ideal supplementary therapy for recurrent ovarian cancer.

[Key words]Ovarian neoplasms; Pseudomonas aeruginosa; Chemotherapy; Immune function; Treatment outcome

收稿日期：(2015-07-22)

[中图分类号]R 711.75

[文献标识码]A

[文章编号]1008-7044(2016)01-0007-03

DOI：10.14126/j.cnki.1008-7044.2016.01.003

[作者简介]陈赛英(1975-)，女，副主任医师，研究生.