王延琳，赵 建，黄春倩，王和枚，丁日高

（军事医学科学院1.野战输血研究所，2.毒物药物研究所，3.抗毒药物与毒理学国家重点实验室，北京 100850）

全氟异丁烯染毒对大鼠肺微血管内皮细胞的影响

王延琳1，2，3，赵 建2，3，黄春倩2，3，王和枚2，3，丁日高2，3

（军事医学科学院1.野战输血研究所，2.毒物药物研究所，3.抗毒药物与毒理学国家重点实验室，北京 100850）

目的 观察体外培养的肺微血管内皮细胞（PMVEC）经全氟异丁烯（PFIB）染毒后其肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、细胞间黏附分子1（ICAM-1）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）和MMP-9的含量变化。方法 采用改进的组织块种植法分离培养大鼠PMVEC，细胞经鉴定后分为正常对照组和5个PFIB染毒组（n=3）。正常对照组为静息状态细胞；染毒组行PFIB暴露（浓度200 mg·m-3，持续5 min）染毒后0.5，1，2，4和8 h分别收集培养上清液和细胞裂解液。ELISA检测TNF-α，IL-1β，ICAM-1，MMP-2和MMP-9含量，明胶酶谱法分析MMP-2和MMP-9酶活性。结果 ①依据细胞生长的形态特征、特异性抗原的表达和植物凝集素结合实验鉴定，采用肺组织块原代培养法获得的细胞均符合PMVEC的特征。②与正常对照组比较，PMVEC经PFIB染毒后2 h细胞裂解液中TNF-α含量显著升高（P<0.05），4和8 h明显回落。细胞培养上清液中TNF-α含量变化趋势与细胞裂解液中TNF-α变化趋势类似，仅发生时间稍滞后。③PFIB染毒后PMVEC激活并合成IL-1β的时间稍滞后于TNF-α，但达峰与持续时间与TNF-α相似。④PFIB染毒后PMVEC培养上清液中ICAM-1含量持续保持于较低水平。⑤PFIB染毒组细胞裂解液中未检测到MMP-2活性，培养上清液中检测到较高水平的MMP-2含量与活性。PFIB染毒组的培养上清液和细胞裂解液中均未检测到MMP-9表达与活性。结论 PFIB染毒刺激存活的PMVEC合成并释放大量TNF-α，IL-1β，MMP-2和结合型ICAM-1。

肺微血管内皮细胞；全氟异丁烯；细胞因子；黏附分子；基质金属蛋白酶

作为重要的化工原料和副产物，全氟异丁烯（perfluoroisobutylene，PFIB）是一种常温下为气态的无色无味低分子量的高氟有机物，能穿透普通防毒面具，且无特效的防治措施，是常见的可引起肺部炎性损伤的有毒化学品。当发生肺部炎性损伤时，肺泡微血管内皮的细胞连接破坏、细胞骨架重排，这些结构的破坏导致液体、蛋白质、炎性介质等进入肺泡［1-4］；……