樊成吉*，屠鸿薇*，陈小辉，柳家贤，彭 涛，孟晓静

（南方医科大学1.公共卫生学院职业卫生与职业医学系，广东省热带病研究重点实验室，2.生命科学学院发育生物学系，广东省人类疾病斑马鱼模型与药物筛选重点实验室，广东广州 510515）

氯化汞对斑马鱼发育的毒性作用及对轴突蛋白2a基因表达的影响

樊成吉1*，屠鸿薇1*，陈小辉2，柳家贤1，彭 涛1，孟晓静1

（南方医科大学1.公共卫生学院职业卫生与职业医学系，广东省热带病研究重点实验室，2.生命科学学院发育生物学系，广东省人类疾病斑马鱼模型与药物筛选重点实验室，广东广州 510515）

目的 观察氯化汞（HgCl2）暴露对斑马鱼胚胎发育时期的毒性作用，以及对神经行为和轴突蛋白（nrxn）2a基因表达的影响。方法 将斑马鱼胚胎在受精后6 h内（6 hpf）暴露在HgCl20.2，0.4和0.8 μmol·L-1中，在24 ～120 hpf时观察HgCl2对斑马鱼死亡率、孵化率和畸形率的影响；用电感耦合等离子体质谱测定体内Hg含量；用Video-Track系统记录斑马鱼幼鱼的行为改变；用吖啶橙染色检测细胞凋亡；用原位杂交和实时定量PCR检测其对nrxn2a基因表达的影响。结果 与正常对照组相比，HgCl20.8 μmol·L-1处理组72 hpf时，斑马鱼的死亡率开始显著升高，在120 hpf时死亡率达到94%（P<0.01）；HgCl20.4 μmol·L-1处理组48 hpf时，斑马鱼的孵化率显著上升（P<0.01）；HgCl20.2，0.4和0.8 μmol·L-1组斑马鱼的胚胎发育畸形，主要表现为脊柱弯曲和卵黄囊肿，各个时间点和浓度组的畸形率显著高于正常对照组（P<0.05，P<0.01）。各处理组斑马鱼体内Hg与正常对照组相比蓄积明显（P<0.01），HgCl20.8 μmol·L-1处理组达到77 μg·g-1。与正常对照组相比，HgCl20.4 μmol·L-1暴露组斑马鱼自发活动的速度减缓（P<0.01），活动程度降低（P<0.05）；凋亡点的数量也出现显著性增加（P<0.01）。斑马鱼胚胎中nrxn2aamRNA表达在受精后24 hpf（P<0.01）和72 hpf（P<0.05）两个时间点呈显著性增加，而nrxn2abmRNA表达在24和48 hpf两个时间点呈显著性下降（P<0.05）。结论 HgCl2对斑马鱼发育有明显影响，主要表现为脊柱弯曲和卵黄囊肿，其行为变化可能与nrxn2a的表达变化有关。

氯化汞；斑马鱼；轴突蛋白；细胞凋亡；行为，动物

金属汞（Hg）广泛应用于化学、医药、冶金以及电器仪器等行业［1］，对环境造成持续的污染，是严重威胁人类健康的重金属之一［2-3］。Hg可通过血胎屏障进入胎儿中枢神经系统［4］。另外，运动神经元可选择性地吸收和储存低剂量无机Hg，这种吸收可能导致神经元的传导速度变慢［5］。……