徐晓阳，欧红萍，彭广能，雷霜霜，田一男，曹雪峰，王玉飞，严光文，钟志军

布鲁氏菌非编码小RNA BSR1526突变株与过表达株的构建及毒力研究

徐晓阳1，欧红萍2，彭广能1，雷霜霜1，田一男1，曹雪峰1，王玉飞3，严光文4，钟志军1

目的 为探讨非编码小RNA BSR1526在布鲁氏菌胞内生存中的作用，构建BSR1526突变株与过表达株并分析它们在模拟胞内环境和小鼠体内的存活能力。方法首先采用Northern blot和RT-PCR验证布鲁氏菌16M在体外刺激条件中BSR1526的转录；然后采用融合PCR构建BSR1526缺失株；将BSR1526插入到质粒pBBR1-MCS4中，电转入16M中构建过表达株16M-BSR1526；最后分析BSR1526缺失株和过表达株在模拟胞内环境以及小鼠体内的存活力。结果BSR1526在布鲁氏菌16M中存在转录，且在不同刺激条件下转录水平不同。BSR1526缺失或过表达影响了布鲁氏菌16M在体外的生长能力，缺失后在热应激、氧化压力及酸性环境下的生存能力下降，在小鼠脾脏内的细菌数量显著下降，表明BSR1526影响了布鲁氏菌的毒力。结论非编码小RNA BSR1526影响着布鲁氏菌16M在胞内生存能力，缺失BSR1526后布鲁氏菌16M抵抗外界不良环境的能力下降，同时在小鼠体内的毒力下降。

布鲁氏菌；非编码小RNA；BSR1526；胞内生存

细菌非编码小RNA(Small non-coding RNA，sRNA)是近年来发现的一类RNA调控子，不编码蛋白质，长度在50～500个核苷酸之间[1]。过去它们被认为是“垃圾RNA”，但随着研究的深入，发现RNA的突变或异常表达与许多疾病的发生密切相关。sRNA广泛参与了生物生命活动的调控[2]。目前认为，细菌sRNAs 在应对环境变化的基因表达调控中发挥作用，是细菌适应环境压力、毒力以及代谢的重要调控子。……