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环介导等温扩增技术结合横向流动试纸条检测猪链球菌2型的应用研究

2016-02-09王利丽魏财文杨春蕾池晶晶鄢明华

中国人兽共患病学报 2016年12期
关键词:检测方法

张 莉,王利丽,魏财文,杨春蕾,路 超,池晶晶,鄢明华

环介导等温扩增技术结合横向流动试纸条检测猪链球菌2型的应用研究

张 莉1,王利丽1,魏财文2,杨春蕾1,路 超1,池晶晶1,鄢明华1

目的 建立一种猪链球菌2型的快速检测方法。方法以猪链球菌2型cps2J基因序列为检测靶标设计6条环介导等温扩增(LAMP)特异性引物,其中2条促环引物分别标记异硫氰酸荧光素(FITC)和地高辛(Dig),用横向流动试纸条(LFD)检测扩增产物,建立猪链球菌2型LAMP-LFD检测方法。结果所建立的检测方法能够特异性的检测出猪链球菌2型,与试验对照菌株不存在交叉反应,其最低检测限为76 cfu/mL,在对100份样品的检测中,LAMP-LFD方法检测出14份阳性样品,培养法检测出12份阳性样品,LAMP-LFD方法检测阳性率略高于病原培养法,两者间的P>0.05无统计学差异。结论所建立LAMP-LFD检测方法具有特异性好、敏感性高、操作简单、快速等特点,适合于动物食品中猪链球菌2型的检测。

猪链球菌2型;cps2J基因;环介导等温扩增;横向流动试纸条

Supported by the National High Technology Research and Development Program of China (No. 2012AA101605), the Agriculture Science and Technology Achievements Transformation and Extension Program of Tianjin (No. 201301030), and the Foun-dation of President of Tianjin Academy of Agricultural Sciences (No. 16003) Corresponding author: Yan Ming-hua, Email: yanmh81971@126.com

猪链球菌病(swinestreptococcosis)是由C、D、F及L群链球菌引起的猪的多种疾病的总称,急性型常表现为出血性败血症和脑炎,慢性型以关节炎、内膜炎、淋巴结化脓及组织化脓等为特征。猪链球菌(S.suis,Ss)是引起猪链球菌病的重要病原之一。根据菌体荚膜多糖的多样性,猪链球菌分为1~34型和1/2型,共35个血清型,其中猪链球菌2型(S.suisserotype2,Ss2)致病力最强。猪链球菌2型不仅可引起猪发病,对人也具有致病性,人感染后会出现发烧、脑炎、败血症等症状,严重者可发生中毒性休克导致多器官衰竭甚至死亡,是一种重要的人兽共患病原菌。自……

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