白清，郭莉阁

(河南省中医院，郑州 450002)

·基础研究·

绞股蓝皂苷联合非诺贝特灌胃治疗大鼠高脂血症效果观察

白清，郭莉阁

(河南省中医院，郑州 450002)

目的 观察绞股蓝皂苷联合非诺贝特灌胃治疗大鼠高脂血症的效果。方法 选取SPF级雄性SD大鼠60只，喂以高脂饲料，分为模型组、绞股蓝组、非诺贝特组、联合组。模型组给予0.5% CMC-Na溶液灌胃，绞股蓝组给予150 mg/kg绞股蓝皂苷灌胃，非诺贝特组给予30 mg/kg非诺贝特灌胃，联合组给予150 mg/kg绞股蓝皂苷+30 mg/kg非诺贝特灌胃。连续给药6周，每天灌胃1次。采血分离血清测定TG、TC、LDL-C、HDL-C、载脂蛋白A(apoA)、载脂蛋白B(apoB)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)；解剖分离组织、脏器，计算肝脏系数、肾脏系数。结果 与模型组相比，绞股蓝组、非诺贝特组和联合组血清TC、TG、LDL-C低(P均<0.05),非诺贝特组HDL-C高(P<0.05)，非诺贝特组和联合组HDL-C/LDL-C高(P均<0.05)；与绞股蓝组相比，联合组TC、TG、LDL-C低(P均<0.05)，HDL-C/LDL-C高(P<0.05)。与非诺贝特组相比，联合组TC、TG低(P均<0.05)。与模型组相比，绞股蓝组、联合组肝脏系数、肾脏系数低(P均<0.05),非诺贝特组肝脏系数低(P<0.05)；与绞股蓝组相比，联合组肝脏系数、肾脏系数低(P均<0.05)，非诺贝特组肝脏系数低(P<0.05)。与非诺贝特组相比，联合组肝脏系数低(P<0.05)。与模型组相比，绞股蓝组、非诺贝特组和联合组血清apoA高(P均<0.05)，非诺贝特组和联合组血清apoB低、apoA/apoB高(P均<0.05)。与绞股蓝组相比，联合组血清apoA和apoA/apoB高(P均<0.05)。与非诺贝特组相比，联合组apoA/apoB高(P<0.05)。与模型组相比，非诺贝特组、绞股蓝组、联合组血清SOD高(P均<0.05)，非诺贝特组、联合组血清MDA低(P均<0.05)。与绞股蓝组相比，非诺贝特组、联合组血清MDA低(P均<0.05)。与非诺贝特组相比，联合组血清SOD、MDA变化不显著。结论 非诺贝特与绞股蓝联合灌胃可以降低高脂血症大鼠血脂血清TC、TG、LDL-C、apoB及肝脏系数、肾脏系数，提高血清HDL-C和血清apoA，其效果优于单用非诺贝特或绞股蓝。

高脂血症；绞股蓝皂苷；非诺贝特；血脂代谢；载脂蛋白；动物实验

绞股蓝又名七叶胆、五叶参、七叶参、小苦药等，根茎或全草可入药。迄今为止，己从绞股蓝中分离得到将近169种达玛烷型绞股蓝皂苷，是人参皂苷的5～6倍[1,2]。绞股蓝所含有的83种与人参皂苷有类似结构骨架的达玛烷型皂苷,在降低胆固醇、降血糖、抗炎和免疫调节等方面有效[3]。非诺贝特是PPARα激动剂，是临床上常用的降脂药[4]。二者联合应用治疗高脂血症的效果尚不明确。本研究用绞股蓝皂苷联合非诺贝特治疗大鼠高脂血症,观察其治疗效果。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 SPF级雄性SD大鼠60只，体质量180～220 g，购于武汉生物制品研究所，许可证号：SCXK(鄂)2013-0006。每笼5只，分开饲养。适应性喂养期间所有大鼠自由进食普通饲料和饮用蒸馏水。饲养环境：每天12 h黑、白循环光照，室温(25±2)℃，相对湿度50%±10%，并定期清洁饲养环境。绞股蓝皂苷由本实验室自制(纯度>60%)，非诺贝特购自Sigma公司；TC、TG、HDL-C、LDL-C、apoA、apoB试剂盒均购于南京建成生物工程研究所。高脂饲料依据文献[5,6]说明，按基础饲料78.8%、猪油10%、蛋黄粉10%、胆固醇1%、胆酸钠0.2%的比例配制。

1.2 高脂血症模型建立、分组及用药方法 所有大鼠适应性饲养7 d后，改喂高脂饲料，自由进食进水，喂养4周，建立高脂血症模型。随机分为模型组、绞股蓝组、非诺贝特组、联合组，各15只。模型组给予0.5% CMC-Na溶液灌胃，绞股蓝组给予150 mg/kg绞股蓝皂苷灌胃，非诺贝特组给予30 mg/kg非诺贝特灌胃，联合组给予150 mg/kg绞股蓝皂苷+30 mg/kg非诺贝特灌胃。连续给药6周，每天灌胃1次。饲养方式不变。

1.3 疗效观察方法 各组大鼠给药6周时，禁食12 h，乙醚麻醉，摘眼球采血，分离血清。根据试剂盒方法测定TC、TG、LDL-C、HDL-C、ApoA、ApoB、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),其中TC、TG、LDL-C、HDL-C用过氧化物酶法测定，ApoA、ApoB用免疫比浊法测定，SOD用羟胺法测定，MDA用硫代巴比妥酸法测定。处死各组大鼠，解剖分离肝脏、肾脏，测定大鼠体质量、肝脏质量、肾脏质量，计算肝脏系数(肝脏系数=肝脏质量/体质量×100%)、肾脏系数(肾脏系数=肾脏质量/体质量×100%)。

2 结果

2.1 各组大鼠给药6周时血脂比较 给药6周时各组大鼠血脂见表1。给药6周时，与模型组相比，绞股蓝组、非诺贝特组和联合组血清TC、TG、LDL-C低(P均<0.05),非诺贝特组HDL-C高(P<0.05)，非诺贝特组和联合组HDL-C/LDL-C高(P均<0.05)；与绞股蓝组相比，联合组TC、TG、LDL-C低(P均<0.05)，HDL-C/LDL-C高(P<0.05)。与非诺贝特组相比，联合组TC、TG低(P均<0.05)。

表1 给药6周时各组大鼠血脂比较±s)

注：与模型组比，aP<0.05；与绞股蓝组相比，bP<0.05；与非诺贝特组相比，cP<0.05。

2.2 各组大鼠给药6周时肝脏系数、肾脏系数比较 给药6周时各组大鼠肝脏系数、肾脏系数见表2。给药6周时，与模型组相比，绞股蓝组、联合组肝脏系数、肾脏系数低(P均<0.05),非诺贝特组肝脏系数低(P<0.05)；与绞股蓝组相比，联合组肝脏系数、肾脏系数低(P均<0.05)，非诺贝特组肝脏系数低(P<0.05)。与非诺贝特组相比，联合组肝脏系数低(P<0.05)。

表2 给药6周时各组大鼠肝脏系数、肾脏系数比较±s)

注：与模型组比，aP<0.05；与绞股蓝组相比，bP<0.05；与非诺贝特组相比，cP<0.05。

2.3 各组大鼠给药6周后血清载脂蛋白比较 给药6周后各组大鼠血清载脂蛋白水平见表3。给药6周后，与模型组相比，绞股蓝组、非诺贝特组和联合组血清ApoA高(P均<0.05)，非诺贝特组和联合组血清ApoB低、ApoA/ApoB高(P均<0.05)。与绞股蓝组相比，联合组血清ApoA和ApoA/ApoB高(P均<0.05)。与非诺贝特组相比，联合组ApoA/ApoB高(P<0.05)。

2.4 各组大鼠给药6周后血清SOD、MDA比较 给药6周后各组大鼠血清SOD、MDA见表4。给药6周后,与模型组相比，非诺贝特组、绞股蓝组、联合

表3 给药6周时各组大鼠血清载脂蛋白水平比较±s)

注：与模型组比，aP<0.05；与绞股蓝组相比，bP<0.05；与非诺贝特组相比，cP<0.05。

组血清SOD高(P均<0.05)，非诺贝特组、联合组血清MDA低(P均<0.05)。与绞股蓝组相比，非诺贝特组、联合组血清MDA低(P均<0.05)。与非诺贝特组相比，联合组血清SOD、MDA变化不显著(P均>0.05)。

表4 各组大鼠血清SOD、MDA比较

注：与模型组比，aP<0.05；与绞股蓝组相比，bP<0.05。

3 讨论

高脂血症是指以血浆中一种或多种脂质成分(主要指甘油三酯和胆固醇)异常增高为特征的代谢紊乱综合征[10]。脂质代谢异常是动脉粥样硬化的首要危险因素，动脉粥样硬化则是导致心脑血管疾病的罪魁祸首。LDL-C一直被认为有致动脉粥样硬化作用，ApoB是LDL-C的主要成分，故ApoB水平的升高也反映了LDL-C的增高。而HDL被认为是一种抗动脉粥样硬化的血浆脂蛋白，是冠心病的保护因子，HDL-C参与胆固醇逆向运转，促进动脉壁胆固醇的清除，是胆固醇从细胞移出不可缺少的接受体。ApoA为HDL-C的主要成分，ApoA既是卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)的激活剂和HDL-C受体的配体，又是HDL-C的主要成分，故ApoA水平的升高也反映了HDL-C的增高。

绞股蓝是名贵中草药，含有人参皂苷类化合物，抗肿瘤、降血糖[11]、调节血脂[12]、抗炎[13]等作用显著。黄萍等[14]发现绞股蓝复方对大鼠性糖尿病肾病模有良好的治疗作用，能有效调节血糖、血脂代谢，抑制糖尿病肾病大鼠早期肾脏肥大和高滤过，减少尿蛋白的排出，保护肾功能，延缓糖尿病肾病的发展。黄晓飞等[15]发现，绞股蓝胶囊具有良好的降血脂作用，其机制是其中的活性成分对肝脏中与脂代谢相关基因的表达有调控作用。非诺贝特是PPARα激动剂，是临床上常用的降脂药，其调节血脂的作用主要体现在降低TC、升高HDL-C。近年来多项研究显示非诺贝特除了降脂作用，还具有抗氧化应激、抑制炎症反应、抑制内质网应激、抗凋亡等作用，并可降低2型糖尿病血管并发症的风险[7～9]。

本研究结果显示,给药6周后，与模型对照组相比，绞股蓝组TC、LDL-C显著降低；与单独应用非诺贝特的调脂作用相似，说明绞股蓝皂苷的调脂作用确切。联合组与绞股蓝组相比较，肝重和肝脏系数都明显降低，但单用绞股蓝或非诺贝特者肝脏重量降低不明显，说明两者联用有一定的增效作用。经给药治疗调节脂代谢后，与模型组相比，绞股蓝组ApoA显著升高，但绞股蓝组ApoB、ApoA/ApoB变化不显著，这可能与给药剂量有关。

高脂饮食在许多组织中能够引起氧化应激效应。当机体氧化应激水平升高后,体内氧自由基增多,使得脂质过氧化产物MDA增加。MDA水平可反映机体过氧化的程度,从而间接地反映机体血管老化的程度。在生理状态下,机体也会有自由基产生,但体内存在的抗氧化酶系统能清除氧自由基,因此不会引起组织细胞过氧化而导致损伤。SOD是这些抗氧化酶的主要代表。本研究结果显示，给药6周后，非诺贝特组、联合组大鼠血清MDA均降低(P<0.05)，联合组与模型组相比血清MDA显著降低(P<0.05)，而其余组降低不明显，说明绞股蓝联合非诺贝特可以提高高脂血症大鼠血清SOD水平，降低血清MDA水平。

调脂药物是否联合应用，也是临床上历来存在分歧的问题。本研究结果显示，绞股蓝皂苷与非诺贝特联合应用6周后，大鼠血清各项检测指标略优于单用绞股蓝组，提示调脂治疗可以联合用药。本研究仅比较了联合用药与单药绞股蓝治疗大鼠高血脂症的疗效及安全性，观察的时间较短，远期的疗效和安全性尚需进一步研究。

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2016-01-12)