赵景壮，徐黎明，刘淼，曹永生，刘红柏，尹家胜，卢彤岩

（中国水产科学研究院黑龙江水产研究所，黑龙江 哈尔滨 150070）

虹鳟传染性造血器官坏死病核酸疫苗工程菌发酵工艺研究

赵景壮，徐黎明，刘淼，曹永生，刘红柏，尹家胜，卢彤岩

（中国水产科学研究院黑龙江水产研究所，黑龙江 哈尔滨 150070）

急性传染性造血器官坏死病（infectious hematopoietic necrosis，IHN）严重威胁虹鳟Oncorhynchus mykiss养殖业，造成严重的经济损失，核酸疫苗已成为虹鳟IHN疾病预防的研究热点。本研究首先检测虹鳟IHN核酸疫苗工程菌的遗传稳定性，结果显示工程菌在连续培养30代后，仍能保持稳定的质粒拷贝数。质粒酶切结果表明：连续培养30代后的质粒依然保持良好的完整性。在筛选高拷贝工程菌的基础上，又研究核酸疫苗的高密度发酵培养基、补料及发酵时间。结果表明：最优的发酵培养基配方为：1.2%胰蛋白胨（Tryptone）、2.4%酵母提取物（Yeast Extract）、0.5%甘油、0.017 mol·L-1KH2PO4、0.072 mol·L-1K2HPO4；补料配方为：3%胰蛋白胨、1.5%酵母提取物、50%甘油，最佳发酵时间为16h。本研究可为虹鳟IHN核酸疫苗的规模化生产提供参考。

虹鳟；传染性造血器官坏死病；核酸疫苗；发酵

传染性造血器官坏死病（infectious hematopoietic necrosis，IHN）是一种严重威胁鲑鳟的急性传染病[1-3]。它主要感染鱼类的脾脏和肾脏等造血组织，引起组织坏死[4]，根据鱼种、鱼龄、病毒菌株及饲养环境的不同，死亡率在80%～100%[5,6]。近年来IHN在我国频繁暴发，使我国的鲑养殖业经济损失严重[7-10]。IHN的病原为传染性造血器官坏死病毒（infectious hematopoietic necrosis virus，IHNV），其表面糖蛋白（glycoprotein，G）是病毒表面的主要抗原，与病毒的毒力强弱直接相关，目前多将其基因作为疫苗研制的主要基因[11-13]。……