银　瑞　董新伟　王　铮

(南阳市中心医院 胸外科，河南　南阳　473009)



顺铂诱导食管癌EC9706耐药细胞中Bcl-2的表达

银瑞董新伟王铮

(南阳市中心医院 胸外科，河南南阳473009)

〔摘要〕目的探讨凋亡抑制蛋白Bcl-2在顺铂(DDP)诱导食管癌EC9706耐药细胞中的表达。方法建立EC9706/DDP细胞，流式细胞仪检测细胞凋亡率，四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率，Western印迹检测DDP处理后EC9706细胞及EC9706/DDP细胞Bcl-2蛋白表达，RT-PCR、荧光定量PCR检测Bcl-2 mRNA水平。结果EC9706/DDP细胞对DDP诱导的凋亡不敏感，Western印迹检测到EC9706/DDP细胞中Bcl-2表达上调，与EC9706细胞相比具有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR、荧光定量PCR检测到EC9706/DDP细胞中Bcl-2 mRNA水平上调，与EC9706细胞相比具有统计学意义(P<0.05)。结论Bcl-2表达上调可能为食管癌EC9706细胞对DDP耐药的重要机制。

〔关键词〕Bcl-2；食管癌；顺铂；耐药

第一作者：银瑞(1973-)，男，硕士，副主任医师，主要从事胸外科疾病的临床诊治和基础研究。

食管癌的治疗方案中，化疗一直占有重要地位，但肿瘤细胞对化疗药物的原发或继发性耐药，以及肿瘤细胞的凋亡缺陷或受阻常导致化疗的失败〔1〕。已知Bcl-2家族在调节细胞程序性死亡及提高肿瘤细胞对化疗药物敏感性方面发挥着重要作用，其重要成员Bcl-2基因在包括食管癌在内的多种肿瘤组织中可过度表达，并不同程度地抑制化疗药物介导的细胞凋亡〔2〕。本研究观察顺铂(DDP)诱导食管癌细胞株EC9706耐药细胞中Bcl-2的表达，旨在探讨EC9706细胞对DDP耐药的机制。

1材料与方法

1.1材料人EC9706细胞由河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室保存；RPMI-1640培养基、购自美国Gibco公司；小鼠抗人Bcl-2单抗购自CST公司；小鼠抗人β-actin单抗及辣根过氧化物酶标记的羊抗小鼠IgG抗体购自北京中杉金桥公司；β-actin 及Bcl-2 引物由上海生物公司合成；四甲基偶氮唑盐(MTT)购于Sigma公司；……