金　亮　张　茜　李柏青　沙　泉

(安徽医科大学免疫学教研室及过敏与免疫研究中心，合肥230032)

评估人T淋巴细胞亚群对结核杆菌脂质抗原的免疫反应①

金亮张茜李柏青沙泉

(安徽医科大学免疫学教研室及过敏与免疫研究中心，合肥230032)

[摘要]目的：观察结核杆菌脂质的一些脂类抗原对人外周血中淋巴细胞活化和增殖的作用，进而探讨脂类抗原在结核感染中是否存在特异性的免疫作用。方法：取健康人外周血单个核细胞(PBMC)，分离诱导出非成熟树突状细胞(imDC)后分别加入结核杆菌脂质全脂质(TLIP)、丙酮可溶性脂质(ASLIP)、纯硫脂(PSLIP)、脂阿拉伯糖(LAM)、脂甘露聚糖(LM)、同时设置非脂类抗原全菌裂解物(WCL)、培养分泌蛋白(CFP)、耐热抗原(Mtb-HAg)、脂多糖(LPS)和空白对照组。用CFSE标记自体淋巴细胞后，与被脂质抗原刺激后的DC共培养。之后，用流式细胞仪(FCM)检测T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+、NKT和 γδT)的增殖和分泌细胞因子( IFN-γ、TNF-α和 IL-4)的情况。结果：相较于空白组，所有脂质都能促进NKT细胞和CD8+T细胞增殖(P<0.05)。相较于空白组ASLIP，LAM和LM可以促进非增殖的CD4+T细胞分泌IL-4，或者促进增殖的CD4+T细胞分泌IFN-γ(P<0.05)。相较于空白对照组，所有脂质抗原(除了LM)都能促进增殖的γδT和 CD8+T细胞分泌IFN-γ和TNF-α，而LM能抑制增殖的CD8+T细胞分泌TNF-α。结论：结核杆菌脂质抗原能激活PBMC的特异性免疫反应，特别是CD1限制性T细胞的应答。

[关键词]结核杆菌脂质抗原；细胞因子；T淋巴细胞亚群；增殖反应

结核病是严重危害人类生命健康的传染病，据世界卫生组织(WHO)2014年报告，全世界估算每年新增850万结核患者，有约140万人死于结核病，中国占新增病例数的12%，仅次于印度(26%)居世界第二位[1]。目前研究表明，T细胞和其表面分子主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ和Ⅱ参与了保护性免疫在宿主对M.tb的蛋白抗原反应中[2]。因此，很多候选的疫苗都是通过M.tb的蛋白抗原作用于免疫细胞后，诱导出潜在的Th1反应[3]。虽然M.tb拥有一层独特的，包含丰富脂类成分的细胞壁，但是，是否脂类成分能够潜在地成为一种预防M.tb的疫苗，目前还很少有人知道。……