何雪梅　郑良栋　张　婷　刘梦楠　冯　涛

(重庆医科大学基础医学院，重庆400000)

·基础免疫学·

H9与HepG-2体外共培养上清对HepG-2增殖迁移及凋亡的影响①

何雪梅郑良栋张婷刘梦楠冯涛

(重庆医科大学基础医学院，重庆400000)

[摘要]目的：研究胚胎干细胞H9与肝癌细胞株HepG-2共培养上清对肝癌细胞HepG-2增殖、迁移及凋亡的影响，并探讨其可能机制。方法：体外共培养H9与HepG-2，于不同时间即12、24、36、48 h取得上清，并把不同浓度上清即20%、40%、60%、80%作用于HepG-2细胞，于倒置荧光显微镜下观察细胞的生长情况和形态变化；用MTS法检测不同浓度上清分别作用HepG-2细胞24、48 h后细胞的增殖情况；应用流式细胞术检测细胞的凋亡情况；用Hochest33258染色检测细胞的凋亡情况；Transwell小室法检测上清对细胞侵袭迁移的影响。结果：不同浓度的共培养上清液均对HepG-2细胞的增殖有一定的抑制作用，并且40%浓度及以上的浓度能明显促进肝癌细胞的凋亡，主要是早期和晚期凋亡，小室法也看出，上清对肝癌细胞的侵袭和迁移也具有明显的抑制作用,同时，上清对正常的肝细胞L02无明显的作用。结论：胚胎干细胞与肝癌细胞HepG-2共培养上清能够在体外明显抑制肝癌细胞HepG-2的增殖、迁移和侵袭，并且促进其凋亡，并且具有浓度依赖性，共培养时间越长，抑制效果越好。说明此上清具有一定的抗肿瘤效应。

[关键词]共培养上清;肝癌细胞HepG-2;胚胎干细胞H9;细胞增殖;细胞凋亡

原发性肝癌(Primary carcinoma of liver)，以下简称肝癌，是我国常见的恶性肿瘤之一。肿瘤的发生，一是由基因决定，二是取决于机体的免疫功能，免疫力下降或者免疫功能失调会导致肿瘤的发生[1，2]。……