王 倩

（辽宁省沈阳市浑南区疾病预防控制中心，辽宁 沈阳 110015）



荧光PCR法与细菌培养法在鼠伤寒沙门菌食物中毒检测中的应用比较

王 倩

（辽宁省沈阳市浑南区疾病预防控制中心，辽宁 沈阳 110015）

【摘要】目的 把荧光PCR法与细菌培养法在鼠伤寒沙门菌食物中毒检测中的应用进行比较。方法 使用以往的细菌培养方式和荧光PCR方式对10份样本实施检验。结果 这10份样本经过检验之后，PVR检验出沙门菌5株，阳性概率相对较高为50%，以往的方式检验出3株沙门菌，阳性概率为30%相对较低。结论 与以往的培养方式进行对比，使用PCR方式能够增强检验出鼠伤寒沙门菌的概率，节约检验时长，合适用在食物中毒这一方面的检验。

【关键词】荧光PCR法；细菌培养法；鼠伤寒沙门菌；食物中毒；检测；应用

对于沙门菌的检验，在现阶段都是依据以往的细菌培养方式实施分离鉴别，为食物中毒提供重要的理论依据，可是这种方式具有一定的限制性，例如，检验时间过长，程序复杂与过多的干扰因子等[1-3]。在生物技术不断发展的今天，研制出一种检验细菌新技术，PCR检验方式有着较强的灵敏性，以及比较高的特殊性，使用方式方便简单和速度较快等优势，被宽泛使用。在这次的食物中毒事件中使用这两种方式进行对比，只是希望能够加强实验室检验速度，可以快速的掌控疫情变化。

1 回顾分析

在2012年3月28日上午10点整，疾病防御中心接到疾控报告：某村村民出现食物中毒事件，依据资料表明，某乡5户共40例，在饭后有31例接连产生恶心，呕吐与发热等现象，此中有4例进入医院进行诊治，潜藏时间较短的为7 h，最久的是15 h。通过检查就餐食品有饭、猪肉与青菜以及鹌鹑蛋等，有31例都食用过鹌鹑蛋，而其他9例没有食用该食品所以为出现病情症状。通过检查病情症状之后最初的判断为有细菌导致的食物中毒。

2 检验

2.1 仪器：荧光PCR仪器，与自动化的微生物鉴别体系，均来自美国。2.2 试剂：不同的增菌培养基于分离培养基、革兰阴性菌鉴别卡、基因提取液以及荧光检验试剂。

2.3 样本与类别：收集有怀疑的样本10份，包含患者肛拭子3份，粪便样本3份，餐后鹌鹑蛋3份，工商局送检鹌鹑蛋1份。

2.4 荧光PCR检验：依据多种细菌实施检验，例如，沙门菌与金黄色葡萄球菌等，进行一系列标准的检验，查看最后的反应体例是多少。2.5 细菌传统分离：依据国家的相关规定实施检验。把以上收集的样本接种培养基，此中，粪便与肛拭子样本先进行增菌，接着选取培养基，把收集的样本按照或许导致食源性疾病实施检验，去除金黄色葡萄球菌与变形杆菌等造成的中毒。然后使用试剂对菌株进行鉴别，得出结论通过血清学分离鉴别[4-5]。

3 检测结果

3.1 PCR检验数据：此次中毒的10份样本之中，就是以上所给粪便等的样本，经过PVR检验出沙门菌5株，阳性概率相对较高为50%。

3.2 细菌培养数据：此次中毒的10份样本之中，就是以上所给粪便等的样本，以往的方式检验出3株鼠伤寒沙门菌，阳性概率为30%相对较低。检验得出的该细菌通过自动化的鉴别之后明确为沙门菌。

4 讨 论

在此次使用者两种技术对于该细菌中毒事件进行检验剖析，由于此次检验中采集的样本较多，份数也比较多，检验内容也是比较多，使用以往的方式，程序比较复杂，例如，样本的增菌以及分离等步骤，很消耗时间，检验阴性的时间也是相对较久，通常需要1周左右，所以，使用以往的鉴别方式在一定程度上检验的效率较低，无法快速的给出此次中毒的病因。而使用新型的方式，包含有增菌过程一起，全部的检验时长只需要大约7 h，有着比较高正确性，显著的加强检验速度，提供最初的数据进行分离培养，提醒在实验过程中要对分离进行观察与思考，减少复杂的实验程序[6]。尤其是功效效率较高，便于实施对病原体的的快速检验。但是该技术也缺陷，PCR主要检验的对象是核酸，但是不论样本中因子的死活，都可以加大核酸的变化，进而导致假阳性增多的现象[7-8]。

根据以上的检验数据，PVR检验出沙门菌5株，阳性概率相对较高为50%，以往的方式检验出3株沙门菌，阳性概率为30%相对较低。使用PCR方式能够有效的加强该病菌的检验概率，节约检验时长，比起以往的检验方式，该技术相对来说比较合适用对中毒进行判断。

参考文献

[1] 王蒋丽，李彩云，曾强，等.荧光PCR法与细菌培养法在鼠伤寒沙门菌食物中毒检测中的应用比较[J].中国卫生检验杂志，2010，20 （12）：3304-3305.

[2] 高杰，王辉，李洁，等.荧光PCR法与细菌培养法在食源性致病检测中的应用[J].中国卫生检验杂志，2011，21（10）：2498-2499.

[3] 郭敏，郎中凯，向晓霞.实时荧光PCR在一起沙门菌食物中毒检测中的应用[J].中国卫生检验杂志，2013，23（2）：372-374.

[3] 黄薇，赵翔，唐晓旻，等.核酸检测技术在细菌性食源疾病检测中的应用探讨[J].现代预防医学，2011，38（2）：344-347.

[4] 秦丽云，郭玉梅，吕国平，等.2011至2012年石家庄地区沙门菌食物中毒分离株分子流行病学特征[J].微生物学杂志，2014，34（1）：84-87.

[5] 周晓红，徐佩华，孙明华，等.实时荧光定量PCR技术在食源性致病菌快速检测中的应用[J].上海预防医学，2014（6）：313-317.

[6] 马淑贞，周卓晟，石晓路.应用实时荧光PCR法快速检测从业体检人群肠道致病菌结果分析[J].热带医学杂志，2013，13（11）：1412-1414.

[7] 宋士利，檀薇，张丽.Real-Time PCR探针法检测食物中毒中沙门菌方法建立及应用[J].中国卫生检验杂志，2012，22（1）：16-18.

[8] 袁慕云，许龙岩，曹际娟，等.基于TaqMan探针双重荧光PCR检测食品中鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌[J].卫生研究，2013，42（3）：491-497.

中图分类号：R155.3

文献标识码：B

文章编号：1671-8194（2016）07-0292-01