张滨 张莹 周卉 李明 赵雪丽 朱芸

血清白细胞介素-25与类风湿关节炎的相关性研究

张滨 张莹 周卉 李明 赵雪丽 朱芸

目的通过检测类风湿关节炎(RA)患者血清白细胞介素(IL)-25水平, 分析其与RA之间的相关性。方法60例RA患者(RA组)和30例健康体检者(健康对照组), 用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清IL-25水平, 观察RA组临床指标并测定类风湿因子(RF)、C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)、拉环瓜氨酸肽抗体(CCP)等实验室指标水平, 分析与IL-25水平相关性。结果RA组血清IL-25水平高于健康对照组, 差异有统计学意义(P＜0.01)。不同RA病情时期患者(RA活动组和临床缓解组)血清IL-25水平比较差异无统计学意义(P＞0.05), 但均高于健康对照组, 差异有统计学意义(P＜0.05)。RA组血清IL-25水平与ESR、CRP、平均疾病活动度评分(DAS28)无相关性(P＞0.05), 与RF呈正相关(r=0.406, P＜0.05)。结论RA患者血清IL-25水平与健康人相比明显升高；血清IL-25对RA的诊断具有一定的临床价值；IL-25参与RA的病理过程, 并可能参加相关抗体的产生过程。

类风湿关节炎；白细胞介素-25

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是以关节组织慢性炎症和破坏为主的自身免疫性疾病［1］, 发病机制尚不明确。近年研究显示, IL-25与RA的发生发展密切相关。本研究通过测定RA患者与健康对照者的外周血IL-25水平, 初步分析其与RA相关关系, 探讨RA中IL-25的临床意义, 现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2012年12月～2013年6月在潍坊市人民医院风湿免疫科就诊RA患者60例(RA组), 均符合ACR2010RA最新诊断标准, 其中男12例, 女48例, 年龄26～77岁, 平均年龄(51±13)岁, 病程3～360个月, 平均病程(27.4±19.6)个月, 关节压痛数(10.4±4.7)个, 关节肿胀数(8.8±4.0)个, 晨僵时间0.1～3.0 h, 平均晨僵(1.0±0.5)h, CCP阳性46例, RF(422.7±448.1)IU/ml, ESR(44.7±17.3)mm/h, CRP (29.1±23.8)mg/L, DAS28评分(5.2±0.9)分。并收集同期健康体检者30例(健康对照组), 其中男14例, 女16例, 年龄20～65岁, 平均年龄(33±10)岁。所有入选病例均排除其他风湿性疾病。

1.2IL-25测定 用ELISA法测定血清IL-25(试剂盒购自美国R&D公司), 严格按照试剂盒内说明进行测定。

1.3指标测定 采用国际公认的常规检测方法测定两组RF、CRP、ESR、CCP抗体等其他实验室指标。

1.4统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件对数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差(±s)表示, 采用t检验；相关性分析采用Pearson相关分析。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1RA组与健康对照组血清IL-25水平比较 RA组中血清IL-25水平为(248.2±106.7)pg/ml, 高于健康对照组(48.5± 25.3)pg/ml, 差异具有统计学意义(P＜0.01)。

2.2RA活动组和临床缓解组血清IL-25水平比较 RA患者的临床缓解标准［2］为：晨僵时间≤15 min；无疲乏感；无关节疼痛；无关节压痛；无关节或软组织肿胀；ESR男性＜20 mm/h, 女性＜30 mm/h, 满足以上5条以上者为临床缓解。根据此标准将RA患者分为活动组(37例)和临床缓解组(23例)。血清IL-25水平分别为(262.7±120.6)pg/ml和(241.5±107.0)pg/ml, 两组比较, 差异无统计学意义(P＞0.05),但均高于健康对照组, 差异有统计学意义(P＜0.05)。

2.3RA组CCP阳性组和CCP阴性组血清IL-25水平比较 RA组中CCP阳性组和CCP阴性组IL-25水平分别为(305.3±130.5)、(208.7±27.3)pg/ml, 两组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。

2.4RA组血清IL-25水平与实验室指标相关分析 RA组血清IL-25水平与ESR、CRP、年龄、关节压痛数、DAS28无相关性(r=0.352、-0.193、-0.058、-0.042、-0.206, P＞0.05)。与病程、关节肿胀数、RF呈正相关(r=0.292、0.311、0.406, P＜0.05)。

3 讨论

RA基本病理表现为滑膜炎、血管翳形成, 可侵犯软骨和软骨下的骨质及关节周围韧带和肌腱, 是造成关节破坏、畸形和功能障碍的病理基础。RA发病机制尚未明确, 但细胞因子在RA的致病中至关重要, 且与RA病情活动密切相关［3］。IL-25是IL-17家族中的新成员, 主要参与Th2细胞介导的免疫应答, 可诱导IL-6、IL-8等前炎症因子, 参与RA病理过程［4］。

本研究以RA患者为研究对象, 分析IL-25在RA患者外周血中的表达, 发现RA组血清IL-25水平明显高于健康对照组, 与相关文献关于IL-25参与RA病理过程的报道相符, 且经治疗已达临床缓解的RA患者血清IL-25水平仍高于健康对照组, 提示IL-25可能对RA的诊断具有一定的临床价值。

也有研究［5］发现, 在关节软骨中有IL-25 的表达, 且可抑制关节软骨基质的合成, 刺激NO的释放和IL-6的产生,在IL-25为10 nmol/L时, 可使黏多糖蛋白的合成降低20%, NO的释放增加400%, IL-6的产生增加330%, 提示IL-25与IL-25R结合后可引起与IL-17R受刺激后相似的下游效应,从而参与关节炎性疾病的发生。抗CCP抗体是RA较早出现且较为特异的抗体, 可作为RA较为敏感的诊断指标［6］, 也是骨破坏的危险因素及判断关节预后的重要指标［7］。本研究中RA组的CCP阳性组与阴性组IL-25差异无统计学意义(P＞0.05), 但本研究只检测了患者CCP阳性率, 并没有定量检测CCP抗体滴度, 因此仅能得出CCP阳性率与RA患者IL-25水平无相关的结论, 但无法反映出CCP抗体含量与IL-25的关系。另外, 本研究结果显示RA组IL-25水平与另一个标记性抗体RF呈正相关, 不能完全排除IL-25参与RA相关抗体产生过程的可能。

在CIA模型研究中Kaiwen等［8］对CIA鼠脾细胞和膝关节滑膜进行 IL-25 实时定量聚合酶链反应(PCR)分析, 其中IL-25 mRNA表达明显增强, 而用ELISA检测CIA小鼠血清和脾细胞培养上清中IL-25 的含量也增加。在CIA的高峰期IL-25水平持续上升, 显著高于对照组和炎症早期。这表明IL-25和RA的疾病活动和进展相关。但本研究结果显示RA活动组血清IL-25水平并不显著高于临床缓解组, 且RA组血清IL-25水平与DAS28、ESR、CRP、关节压痛数无相关性。可能与本研究病例数较少或者IL-25参与RA病程的机制复杂相关。

本研究结果显示RA患者血清IL-25水平明显升高, 说明其参与了RA 病理过程。在CIA模型中, 外源性给予重组IL-25可致关节炎的发生, 而抑制IL-25的下游信号则可减少其关节肿胀和骨破坏, 同样表明IL-25在RA的发病过程中起到的重要作用。可推断, IL-25可能参与RA的发生发展, 对RA的诊断有价值, 但其作用机制需要进一步研究。相信随着研究的完善, IL-25有望成为RA未来治疗的新靶点。

［1］蒋明, 朱立平, 林孝义.风湿病学.北京:科学出版社, 1995: 815.

［2］中华医学会风湿病学分会.类风湿关节炎诊断及治疗指南.中华风湿病学杂志, 2010, 14(4):265-270.

［3］徐晓玲, 梁瑞霞, 黄君健, 等.细胞因子在类风湿关节炎发病机制中的作用.生物技术通讯, 2008, 19(1):111-114.

［4］Hurst SD, Muchamuel T, Gorman DM, et al.New IL-17 family members promote Th1 or Th2 responses in the lung: in vivo function of the novel cytokine IL-25.J Immunol, 2002, 169(1):443-453.

［5］唐宏勇, 李忆农.IL-25与自身免疫性疾病.新医学, 2013, 44(12):807-812.

［6］Vincent C, Simon M, Sebbang M, et al.Immunoblotting detection of autoantibodies to human epidermis filaggrin: a new diagnostic test for rheumatoid arthritis.J Rheumatol, 1998, 25(5):838-846.

［7］Kroot EJ, de Jong BA, Van Leeuwen MA, et al.The prognostic value of anticyclic citrullinated peptide antibody in patients with recent-onset rheumatoid arthritis.Arthritis Rheum, 2000, 43(8):1831-1835.

［8］Kaiwen W, Zhaoliang S, Yinxia Z, et al.Changes and significance of IL-25 in chicken collagen II-induced experimental arthritis (CIA).Rheunmtol Int, 2012, 32(8):2331-2338.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.03.009

2015-10-13］

261041 潍坊市人民医院风湿免疫科(张滨 周卉李明 赵雪丽 朱芸)；潍坊市妇幼保健院(张莹)