陈琛 马远征



分子线性探针测定法在结核病诊断中的研究进展

陈琛 马远征

耐药Mtb的日益增多和常规诊断技术的迟滞是结核病诊断延迟和预后不佳的重要原因。分子线性探针测定法是近年来兴起的一种PCR技术，包括比利时Innogenetics 公司分子线性探针法(INNO-LPA)、Genotype MTBDR分子线性探针法、自身免疫性诊断Mtb耐药分子线性探针法(the autoimmun diagnostika TB resis-tance line probe assay，AID-LPA)和反向杂交Mtb耐药分子线性探针法(the REBA MTB-rifa®assay，REBA-LPA)。分子线性探针测定法既可以快速、准确诊断结核病，又可检测出常见耐药基因，而且其敏感度及特异度也很高。作者就近几年来分子线性探针技术的研究进展进行综述。

结核； 分子探针； 诊断

2014年，WHO报道全球约 1/3人口感染过Mtb，其中约1/10感染者最终发展为结核病；结核病仍然是世界上最致命的传染性疾病之一[1]。Mtb常规检测方法敏感度低、耗时长，易造成诊断延误。近年兴起的分子线性探针技术(molecular line probe assay, LPA)已得到了广大研究人员的认可，可确保更多的结核病患者得到快速、准确的诊断和治疗[1]。现就LPA在结核病诊断中的应用进行综述。

一、LPA简介

LPA又称PCR-单链探针反向杂交试验，是通过应用生物素标记的特异引物进行靶核酸(DNA)的扩增，并将扩增产物变性后与固定在尼龙膜上的特异寡核苷酸探针杂交，通过酶联免疫显色法显示结果，1次杂交可以检测多种靶序列。LPA是一类检测方法的统称，具体包括比利时Innogenetics 公司分子线性探针法(INNO-LPA)、GenoType法、自身免疫性诊断Mtb耐药分子线性探针法(the autoimmun diagnostika TB resistance line probe assay，AID-LPA)和反向杂交Mtb耐药分子线性探针法(the REBA MTB-rifa®assay，REBA-LPA)[2]。

1.INNO-LPA：INNO-LPA是最早应用临床的LPA，由比利时Innogenetics公司于2000年推出，可用于检测Mtb临床分离株和涂阳痰标本及其利福平(rifampicin, RFP)耐药[3]。……