阿仑膦酸钠联合辛伐他汀对雌性去势大鼠骨质疏松的影响

许大勇

(河南省中医院脊柱科，河南郑州450002)

摘要〔〕目的观察阿仑膦酸钠联合辛伐他汀对雌性去势大鼠骨质疏松(OP)的影响。方法50只雌性SD大鼠随机分为模型组(n=40)与假手术组(n=10)，模型组完整摘除双侧卵巢组织，假手术组仅切除卵巢周围部分脂肪组织，建模成功后，将模型组再随机分为对照组，阿仑膦酸钠组，辛伐他汀组和联合用药组。假手术组和对照组给予生理盐水5 ml·kg-1·d-1灌胃，阿仑膦酸钠0.5 mg·kg-1·d-1灌胃，辛伐他汀组给予辛伐他汀20 mg·kg-1·d-1灌胃，联合用药组给予阿仑膦酸钠0.5 mg·kg-1·d-1+辛伐他汀20 mg·kg-1·d-1灌胃，疗程均为8 w。比较各组血浆碱性磷酸酶(ALP)、钙离子(Ca2+)、血清无机磷(P3+)水平以及骨密度和应力试验。结果①各组大鼠血清Ca2+、P3+比较无统计学差异(P>0.05)，与假手术组相比对照组、阿仑膦酸钠组、辛伐他汀组、联合用药组血清ALP均显著提高(P<0.05)，阿仑膦酸钠组和联合用药组血清ALP显著低于对照组和辛伐他汀组(P<0.05)；②与假手术组相比，对照组、阿仑膦酸钠组、辛伐他汀组、联合用药组股骨密度均显著降低(P<0.05)，阿仑膦酸钠组、联合用药组股骨密度较对照组显著增加(P<0.05)，辛伐他汀组股骨密度与对照组比较无统计学差异(P>0.05)；③与假手术组相比，对照组、阿仑膦酸钠组、辛伐他汀组、联合用药组应力试验均显著降低(P<0.05)，阿仑膦酸钠组、联合用药组应力试验较对照组显著增加(P>0.05)，辛伐他汀组应力试验与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。 结论辛伐他汀抗OP需在阿仑膦酸钠应用的前提下充分发挥，但他汀类药物不能起到很好的抗OP作用。

关键词〔〕骨质疏松；阿仑膦酸钠；辛伐他汀；去势

中图分类号〔〕R56〔文献标识码〕A〔

第一作者：许大勇(1973-)，男，硕士，主治医师，主要从事脊柱外科方面的研究。

骨质疏松(OP)好发于绝经后妇女及老年人〔1〕。阿仑膦酸钠是骨代谢调节剂，具有抑制破骨细胞活性，抑制骨吸收的作用，被临床上用于绝经后妇女OP的治疗〔2〕。研究发现〔3〕，他汀类药物除具有调节血脂功能外，还具有促进成骨细胞增殖及分化的作用，为OP治疗提供了新的方向。本研究观察阿仑膦酸钠联合辛伐他汀对雌性去势大鼠OP的影响，旨在为OP的治疗提供理论依据。

1材料与方法

1.1材料 雌性SD大鼠50只，8～10周龄，体重220～240 g，平均(232±5)g，由河北医科大学实验动物中心提供；常温低速离心机；全自动生化分析仪(Sysmex Chemix-180型)；双能X线骨密度仪(DEXA，Discovery-Wi型，美国Hologic公司生产)；万能材料试验机(太原理工大学生物力学研究所提供)；阿仑膦酸钠(扬子江药业集团有限公司)，辛伐他汀(杭州默沙东制药有限公司)，青霉素钠。

1.2动物模型的复制与实验分组50只SD雌性大鼠随机分为模型组(n=40)与假手术组(n=10)，在适应性喂养1 w后建模，模型组给予2%戊巴比妥钠40 mg/kg腹腔注射麻醉，经背部中线第二腰椎水平做纵行切口，充分显露卵巢，完整摘除双侧卵巢组织，假手术组仅切除卵巢周围部分脂肪组织。喂养8 w后将模型组随机分为对照组，阿仑膦酸钠组，辛伐他汀组和联合用药组，每组10只，各组随机选取2只大鼠，处死后进行左侧股骨密度测定，确定是否造模成功。确定成功后剩余大鼠腹腔麻醉，左侧大腿外侧行2～3 cm纵行切口，分离股骨中段，小钢锯锯断后应用克氏针髓内固定，术后常规应用青霉素预防感染。假手术组和对照组给予生理盐水5 ml·kg-1·d-1灌胃，阿仑膦酸钠0.5 mg·kg-1·d-1灌胃，辛伐他汀组给予辛伐他汀20 mg·kg-1·d-1灌胃，联合用药组给予阿仑膦酸钠0.5 mg·kg-1·d-1+ 辛伐他汀20 mg·kg-1·d-1灌胃，疗程均为8 w。

1.3观察指标用药治疗8 w后2%戊巴比妥钠40 mg/kg腹腔注射麻醉，快速心脏取血8 ml，3 000 r/min离心10 min，分离上清液，应用全自动生化分析仪测定血浆碱性磷酸酶(ALP)、钙离子(Ca2+)、血清无机磷(P3+)。拔除克氏针，取左侧股骨，应用双能X线骨密度仪测定股骨中段骨折部位上下3 mm区域骨密度。将股骨置于万能材料试验机，进行三点弯曲，最大破坏负荷试验，加载速度2 mm/min。

1.4统计学方法应用SPSS17.0软件进行单因素方差分析和SNK法。

2结果

2.1各组大鼠血清ALP、Ca2+、P3+比较表1可见，各组大鼠血清Ca2+、P3+比较无统计学差异(P>0.05)，与假手术组相比，对照组、阿仑膦酸钠组、辛伐他汀组、联合用药组血清ALP均显著提高(P<0.05)，阿仑膦酸钠组和联合用药组血清ALP显著低于对照组和辛伐他汀组(P<0.05)。

表1　各组大鼠血清ALP、Ca 2+、P 3+比较

与假手术组比较：1)P<0.05；与对照组比较：2)P<0.05；与辛伐他汀组比较：3)P<0.05

2.2各组大鼠股骨密度比较与假手术组〔(0.197±0.006)g/cm2〕相比，对照组〔(0.144±0.008)g/cm2〕、阿仑膦酸钠组〔(0.158±0.007)g/cm2〕、辛伐他汀组〔(0.149±0.006)g/cm2〕、联合用药组〔(0.170±0.010)g/cm2〕股骨密度均显著降低(P<0.05)，阿仑膦酸钠组、联合用药组较对照组显著增加(P<0.05)，辛伐他汀组与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。

2.3各组大鼠股骨生物力学比较与假手术组〔(183.17±8.28)N〕相比，对照组〔(153.28±7.45)N〕、阿仑膦酸钠组〔(166.23±7.07)N〕、辛伐他汀组〔(156.16±6.67)N〕、联合用药组〔(174.45±8.01)N〕应力试验均显著降低(P<0.05)，阿仑膦酸钠组、联合用药组较对照组显著增加(P<0.05)，辛伐他汀组与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。

3讨论

阿仑膦酸钠是一种稳定的无机焦磷酸盐类似物，与骨内羟磷灰石有强亲和力。能进入骨基质羟磷灰石晶体中，当破骨细胞溶解晶体，药物被释放，能抑制破骨细胞活性，并通过成骨细胞间接起抑制骨吸收作用，从而使骨密度增加〔4〕。但由于在骨转换过程中阿仑膦酸钠也同时抑制了成骨细胞活性，可能影响骨折愈合〔5〕。另有研究表明〔6〕，阿仑膦酸钠口服吸收后主要在小肠内吸收，但吸收程度很差，生物利用度约为0.7%，且食物和矿物质等可显著减少其吸收，故临床效果有限。

近年来有研究显示，他汀类药物能够促进啮齿类动物骨痂形成，提高骨密度，在OP防治上具有广阔的应用前景〔7，8〕。一项英国的研究报道〔9〕，长期应用他汀类药物可以使骨折危险性显著降低。美国新泽西州的一项病例对照研究显示〔10〕，他汀类药物可以使使用者髋部骨折发生率降低0.37。但Nakashima等〔11〕研究发现他汀类药物并不能阻止去势大鼠骨量的丢失，只对骨转换和骨代谢有刺激作用。本研究结果支持Nakashima等〔11〕的研究报道，表明辛伐他汀对去势大鼠骨量的丢失的阻止作用有限，但联合阿仑膦酸钠则对骨转换和骨代谢有刺激作用。从各组大鼠股骨密度和应力试验结果比较来看，也支持上述观点。笔者认为他汀类药物具有促进骨形态蛋白2基因表达的作用，通过促进骨细胞分化影响骨的形成，而这种作用可能在阿仑膦酸钠应用的前提下充分发挥，仅他汀类药物不能起到很好的抗OP作用〔12，13〕。另外，阿仑膦酸钠联合辛伐他汀抗骨质疏松作用较单独应用阿仑膦酸钠更佳，这可能与两种药物的协同机制有关，对OP的临床治疗具有一定意义〔14〕。

4参考文献

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7卜建龙，徐亮，张品一，等.不同用药方案阿仑磷酸钠治疗老年性骨质疏松症的临床疗效分析〔J〕.中国骨质疏松杂志，2014;20(2):181-4.

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9Seferos N，Pantopoulou A，Kotsiou A，etal.The influence of simvastatin in rats mandible and femur bone mass under Freund's adjuvant arthritis〔J〕.Stomatologija，2012;14(2):46-52.

10Brandt NJ，Stefanacci RG.Discontinuation of unnecessary medications in older adults〔J〕.Consult Pharm，2011;26(11):845-54.

11Nakashima Y，Haneji T.Stimulation of osteoclast formation by RANKL requires interferon regulatory factor-4 and is inhibited by simvastatin in a mouse model of bone loss〔J〕.PLoS One，2013;8(9):e72033.

12刘茗露，王光辉，尹华.阿仑膦酸钠治疗老年骨质疏松的临床疗效〔J〕.中国老年学杂志，2014;34(4):917-8.

13李德梅，蔡莉莉，徐剑刚.阿仑膦酸钠联合阿法骨化醇治疗老年慢性阻塞性肺疾病患者骨质疏松症〔J〕.实用老年医学，2014;28(3):226-9.

14权朋勃，王明礼.注射型唑来膦酸与阿仑膦酸钠治疗绝经后骨质疏松症的临床比较〔J〕.中国妇幼保健，2014;29(8):1283-5.

〔2015-01-19修回〕

(编辑李相军/滕欣航)

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