丁飞，袁觉，王昆荣，徐莉，骆祥

（泰兴市林业技术推广中心，江苏 泰兴 25400）

不同采集期不同林龄不同部位银杏叶黄酮含量测试

丁飞，袁觉，王昆荣，徐莉，骆祥

（泰兴市林业技术推广中心，江苏 泰兴 25400）

根据泰兴地区不同时期、不同树龄、不同采集部位银杏叶黄酮含量测定，银杏叶生长有两个高峰期，即4月份黄酮含量出现一个高峰期，7月份是全年含量最低点，8月份以后，银杏叶中总黄酮含量又随着生长期的延长而逐渐上升，直到10月份达到最高峰。银杏长枝不同部位银杏叶黄酮含量差异极显著，上部叶黄酮含量最高；中部叶和下部叶黄酮含量差异不显著。银杏中短枝不同部位银杏叶黄酮含量差异极显著，上部叶黄酮含量最高。

银杏叶；采样；黄酮；银杏白茶

银杏茶是利用银杏（Ginkgo biloba）的叶子采取先进技术生产而成，含有丰富的蛋白质、氨基酸、矿物质和维生素等多种营养成分。关于银杏叶不同时期黄酮含量动态消长变化的报道有不同结果[2-7]，如叶黄酮含量秋季较高，春季次之，夏季最低；叶黄酮含量在5～10月份逐渐升高；叶黄酮含量以芽期（4月份）最高，其次才是8月份的绿叶；叶黄酮含量变化规律不明显。本试验选择适宜的采叶树、采叶期及采叶部位，对银杏茶的开发利用和质量保证尤其重要。

1 材料与方法

1.1 试验材料

泰兴市银杏种质资源圃银杏园内银杏叶。

1.2 试验方法

1.2.1 色谱条件

Waters Nova-pak C18色谱柱（3.9 mm×150 mm，4 μm）；流动相∶甲醇-四氢呋喃水（20：12：75）；流速0.6 mL/min；ELSD漂移管温度100℃；载气量2.5 L/min；进气量20 μL。

1.2.2 供试品溶液制备

取已测过水分（2000年版《中华人民共和国药典》一部附录IX H第一法）的银杏叶粉末0.8 g，精密称定，置100 mL圆底烧瓶中，精密加入25 mL甲醇-25%、盐酸溶液(4∶1)混合液，闭塞，称重，沸水浴回流1 h，取出放冷，称重，以甲醇补足减失重量，摇匀，过滤，取续滤液用0.45 μm的滤膜过滤，作为供试品溶液[1]。

1.2.3 对照品溶液的制备

精密称取槲皮素、山奈酚、异鼠李素对照品适量加甲醇制成每毫升分别含0.315 6、0.249 2、0.140 0 mg的溶液作为储备液，临用前分别精密吸取1.0、0.4 mL置5 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。

1.3.4 标准曲线的制备

分别配制不同浓度的槲皮素、山奈酚、异鼠李素混合对照品溶液，各进样20 μL，按色谱条件测定。

1.3 主要试剂和仪器

槲皮素标准品，南京泽朗医药科技有限公司生产；山奈酚标准品，南京泽朗医药科技有限公司生产；异鼠李素标准品，南京泽朗医药科技有限公司生产；色谱甲醇色谱纯，上海陆都化学试剂厂生产。Waters-e2695高效液相色谱仪，美国Waters公司生产；101-1型干燥箱，上海仪器总厂生产；AL-104电子分析天平，梅特勒-托利多仪器有限公司生产。

2 结果与分析

2.1 不同时期、不同树龄银杏叶黄酮含量

对泰兴市2～6年生4至10月份银杏叶黄酮含量进行测定，结果表明，银杏叶在萌芽到展叶期黄酮含量较高，即4月份黄酮含量出现一个高峰期；随着叶片的逐渐生长，黄酮含量反而逐日下降，7月份是全年含量最低点。8月份以后，银杏叶中总黄酮含量又随着生长期的延长而逐渐上升，直到10月份达到最高峰（见表1）。

表1 不同时期、不同树龄银杏叶黄酮含量测定结果（mg/g）

2.2 不同采集部位银杏叶黄酮含量

2.2.1 长枝不同部位银杏黄酮含量

按照试验方法分别测定2～3年生银杏树长枝（枝长大于25 cm）枝条5月上旬的上部叶（叶梢下移3叶范围）、中部叶（枝条中间上下移动2叶范围）、下部叶（枝条基部叶上移3叶范围）黄酮含量，试验重复5次。从图1可知，长枝上、中、下部银杏叶平均黄酮含量分别为22.11mg/g、20.02mg/g、18.86 mg/g，三部位叶片黄酮平均值达20.33 mg/g。

表3 长枝不同部位黄酮含量多重比较分析（mg/g）

方差分析结果表明（表2），长枝不同部位银杏叶黄酮含量差异极显著。多重比较结果显示（表3），上部叶黄酮含量与中、下部叶差异极显著，且含量最高，为22.11 mg/g；中部叶和下部叶黄酮含量差异不显著。

2.2.2 中短枝不同部位银杏黄酮含量

按照试验方法分别测定2～3年生银杏树中短枝（枝长小于25 cm）枝条5月上旬的上部叶（枝梢叶下移3叶范围）、中部叶（枝条中间上下移动2叶范围）、下部叶（枝条基部叶上移3叶范围）黄酮含量，试验重复5次。从图2看出，上、中、下部银杏叶平均黄酮含量分别为21.12 mg/g、19.22 mg/g、18.36 mg/g。

表4 中短枝不同部位银杏叶黄酮含量方差分析

表5 中短枝不同部位银杏叶黄酮含量多重分析（mg/g）

方差分析结果显示（表4），中短枝不同部位银杏叶黄酮含量差异极显著。多重比较（表5）结果显示，上部叶黄酮含量与中部和下部叶差异极显著，且含量最高，为21.12 mg/g；中部叶和下部叶黄酮含量差异不显著。

3 小结

根据泰兴地区不同时期、不同树龄、不同采集部位银杏叶黄酮含量测定，参照我国名优茶鲜叶采摘标准及制作工艺要求，2～3年生银杏树4、5月份中上部银杏叶黄酮含量较高，并且制成的茶叶可塑性强，从而进一步提高了银杏叶茶质量。

[1]钱大玮，鞠建明，朱玲英，等.不同树龄银杏叶在不同季节中总黄酮和总内酯的含量变化[J].中药材.2002，33（11）：1025-1027.

[2]陈秀珍.银杏不同生长期总黄酮含量的测定[J].广西植物，1988，8（4）：363-364.

[3]杨柳，欧阳沼湘，辜忠春，等.银杏生长中黄酮含量变化十分复杂研究初报[J].确良湖北林业科技，1997，3：5-7.

[4]史继孔，王发渝.银杏树树龄、性别、繁殖方式及采叶期对叶片银杏黄酮、内酯含量的影响[C].湖北：中国林学会经济林分会银杏研究会，湖北省随州市林业局，1998，381-382.

[5]苑可武，孟宪惠.银杏叶中黄酮含量的季节性变化[J].中草药.1999，28（4）：211-212.

[6]潘福生，刘晚苟.银杏资源优化的研究.97'银杏国际研讨会[C]. 北京：97'银杏国际研讨会组委会.1997，57-59.

[7]郁青，沈兆邦.银杏有效成分含量影响因素初探.97'中国银杏开发研究会文集会编[C]. 北京：国家科委中国农林技术开发中心，1997，78-83.

Measurements of the Flavonoid Contents in Leaves of Ginkgo biloba from Different Perioda,Ages and Parts

DING Fei,YUAN Jiao,WANG Kunrong,XU Li，LUO Xiang
(Taixing Municipal Center for Forestry Technology Promotion，Taixing 225400，Jiangsu，China)

The leaves of Ginkgo biloba have 2 growth peaks based on the flavonoid contents measurements in leaves of Ginkgo biloba from different periods,different ages,different regions of Taixing City,and the flavonoid contents reached the peak in April and the lowest point in July.In August and afterwords,the total flavonoid contents in leaves of Ginkgo biloba gradually increased with the extension of the growth period and reached the peak in October.The flavonoid contents were significantly different in leaves of Ginkgo biloba from different parts of long branches with the highest flavonoid contents in leaves from the upper parts while the flavonoid contents were not significantly different in leaves from the middle and lower parts.The flavonoid contents were significantly different in leaves of Ginkgo biloba from different parts of short and middle branches with the highest flavonoid contents in leaves from the upper parts.

Leaves of Ginkgo biloba;Sampling;Flavonoids;Ginkgo white tea

S792.95

A

2095-0152（2015）03-0021-02

2015-03-23

2015-05-08

丁飞（1976- ），男，林业高级工程师，主要从事林业技术推广工作。E-mail:442187641@qq.com，

杨婷婷）