李天芝，于新友，沈志强,2

（1.山东绿都生物科技有限公司，山东滨州　256600；2.山东省滨州畜牧兽医研究院，山东滨州　256600）

枯草芽孢杆菌特异性PCR快速检测方法的建立和应用

李天芝1，于新友1，沈志强1,2

（1.山东绿都生物科技有限公司，山东滨州256600；2.山东省滨州畜牧兽医研究院，山东滨州256600）

参照GenBank中登录的枯草芽孢杆菌16S rRNA基因，设计1对引物，扩增片段大小为460 bp的基因片段，该方法对枯草芽孢杆菌检测的灵敏性为1pg总DNA量，对枯草芽孢杆菌DNA的扩增结果为阳性，对照菌株扩增结果均为阴性，成功地建立枯草芽孢杆菌PCR检测方法，且该方法具有快速、灵敏度高、特异性强等优点。

枯草芽孢杆菌；16S rRNA基因；PCR；方法

枯草芽孢杆菌是一种可形成芽孢的好氧革兰氏阳性菌，该菌具有生长条件简单、耐温度变化、快速复活、快速生长和较强分泌酶等特点[1]。枯草芽孢杆菌是农业部允许作为饲料添加剂的两种芽孢杆菌之一，在自然界中分布广泛，易于分离培养，对人畜无毒无害，能产生脂肽类、氨基酸和磷脂类等多种抗菌素和酶，具有广谱抗菌活性，可改善动物肠道菌群结构，增强免疫力，促进生长发育，提高生产性能的作用[2-3]。近年来，国内外对于枯草芽孢杆菌在饲料加工方面的应用有大量相关报道。猪饲料中添加一定量的枯草芽孢杆菌，能增强仔猪免疫力、提高生长性能[4]。蛋鸡饲料中添加枯草芽孢杆菌，即能增加种鸡的产蛋量和合格率，还能提高蛋的受精率、孵化率和健雏率[5]。肉鸡饲料中添加枯草芽孢杆菌能改善其肠黏膜的抗氧化和免疫功能，从而提高肉鸡的生长性能[6]。……