高压干燥保存对小鼠供心冷缺血再灌注损伤中自噬及凋亡作用的影响
2015-12-02郑少忆郭惠明陈寄梅
张 瑞,黄 帅,富 旗,郑少忆,郭惠明,陈寄梅,庄 建,朱 平
0 引 言
终末期心脏疾病最好的治疗方法是心脏移植。临床上应用最多的心脏保存方式是单纯低温浸泡保存,最常用的浸泡液则是组氨酸-色氨酸-酮戊二酸盐液(histidine-tryptophan-ketoglutarate solution,HTK)。但浸泡保存的安全缺血时间限制为5~6 h,超过这一时限,心肌可出现不可逆的损伤。心脏保存时间过短是供心缺乏的因素之一,限制了心脏移植手术的开展。日本学者通过将大鼠心脏保存在高压干燥环境中,在保证较高复跳率的前提下显著延长了供心保存时间[1]。但其研究仅停留在现象观察,未与其他保存方式进行比较,也未进行生物学方面的检测。近些年国内外对于干燥保存的进一步研究几近空白。本研究是在此基础上,对供心高压干燥保存与HTK液浸泡保存移植后的复跳率、移植后2 h供心活力评分、移植后24h凋亡指数、移植后24h自噬标志性蛋白微管相关蛋白1-轻链3-Ⅱ(microtubuleassociated protein 1 light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)及 B 细胞白血病/淋巴瘤-2(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)蛋白的表达进行比较,观察一氧化碳和氧气混合气体的高压干燥保存方式是否优于HTK液浸泡保存,并探讨该保存方式的可能作用机制。
1 材料与方法
1.1 实验动物与分组 SPF级C57BL/6雄性小鼠84只。供鼠4~6周龄,体重(21±2)g,共48只;受鼠6~8周龄,体重(29±2)g,共36只,所有实验用鼠均购自中山大学实验动物中心(合格证号:No.44008500005103),饲养在屏障环境内,并实行严格的微生物控制,同时保证屏障环境内温度控制在20℃ ~25℃,日温差<3℃,相对湿度50% ~70%。供鼠随机分为4组(n=12):对照组、即刻移植供体组、HTK浸泡保存供体组及高压干燥保存供体组。……
